固相萃取與液相色譜分析的結(jié)合

固相萃取與液相色譜分析的結(jié)合

萬(wàn)海濱 加拿大博朗科技有限公司

將樣品前處理和儀器分析結(jié)合,  有助于改進(jìn)分析結(jié)果的重復(fù)性和提高樣品處理的效率。

通過(guò)樣品前處理的自動(dòng)化,  還可以減少操作人員的勞動(dòng)強(qiáng)度和對(duì)有害溶劑的接觸。加拿 大博朗科技為將樣品前處理和色譜分析結(jié)合提供兩種解決方案。

方案一: SPE-04 離線/在線兩用固相萃取儀

SPE-04既可以進(jìn)行離線的固相萃取又可以進(jìn)行在線的樣品凈化和色譜進(jìn)樣。  此外,  還可 以在控溫條件下進(jìn)行衍生化。

注射泵

加熱環(huán)

應(yīng)用實(shí)例:  血漿中雌激素的分析

1.血漿樣品經(jīng)離心去蛋白后取0.5毫升,  用水稀釋至4毫升,  用SPE柱萃取

2.用2毫升水清洗SPE柱,  然后用0.5毫升甲醇洗脫/收集

3.與丹磺酰氯和堿性緩沖液進(jìn)行衍生化

4.液相色譜進(jìn)樣

5.  觸發(fā)液相色譜分析.

60 oC/pH10

+

Estrone Dansyl chloride

SPE-04的特點(diǎn)

1.  離線固相萃取

多功能樣品處理儀可以作為普通的自動(dòng)固相萃取儀器使用。  操控也不需腦,  只用7 個(gè)按鍵便可以完成全部操作。

2.在線固相萃取

當(dāng)使用在線模式時(shí),  凈化后的組份直接進(jìn)入液相色譜儀,  不需要濃縮和樣品轉(zhuǎn)移等 步驟,  既可以提高效率和重復(fù)性,  又可以減輕操作人員的勞動(dòng)強(qiáng)度。儀器控制軟件 和大多數(shù)HPLC軟件相容,  安裝和使用都非常方便。

3.  在線衍生的功能。目標(biāo)化合物經(jīng)SPE凈化后,  可以自動(dòng)和一或二種衍生化試劑混 合。  在控溫的條件下（30~80oC）反應(yīng)后,  引入HPLC。雖然一些的HPLC自動(dòng)進(jìn)樣

器也有柱前衍生的功能, 但是只能在室溫下進(jìn)行,  既限制了衍生化試劑的選擇范圍,

又有可能因為溫度波動(dòng)或凈化不好增加誤差。

4.  直接進(jìn)樣 多功能樣品處理儀可以直接用做HPLC自動(dòng)進(jìn)樣器。因此用于在線固相萃取的HPLC當(dāng)

做普通HPLC使用時(shí)不需要另外配置進(jìn)樣器。

方案二:  LC-03  在線固相萃取儀用于液體樣品的直接分析

LC-03在線固相萃取儀將萃取凈化和HPLC分析結(jié)合進(jìn)行,  可用于水樣的直接分析。它和多 功能樣品處理儀的一個(gè)主要不同在于多功能樣品處理儀可以每個(gè)樣品換一個(gè)SPE柱,  而在 線固相萃取儀是數(shù)十個(gè)樣品共用一個(gè)SPE柱。

如果采用離線萃取,  樣品只有約1%可以注入 HPLC。而采用在線萃取,  樣品是全部注入 HPLC。因此在線萃取使用20毫升樣品就可以 達(dá)到離線萃取2000毫升同樣的靈敏度。

LC-03的工作原理:

1. 注射泵抽取樣品 2. 注射泵由反方向?qū)悠?/span>注入SPE柱

3. 清洗SPE柱 4. 將富集的目標(biāo)分析物轉(zhuǎn)入 HPLC 柱

自來(lái)水中菲的直接分析.  SPE  柱,  TrapN;  色譜分析柱  PromSil  C18;  上樣體積,  40  mL;  檢測(cè)波長(zhǎng),  252  nm。

LC-3的特點(diǎn)

1.  注射泵可以從兩個(gè)方向淋洗SPE柱

采用反方向上樣,  正方向清洗和洗脫,  可以防止樣品中的顆粒進(jìn)入分析柱,  并有效防止色 譜峰的擴(kuò)散.

2.  操作不用電腦

通過(guò)儀器的操作面板就可以完全操控儀器.  不會(huì)干擾分析儀器的運(yùn)行,

兩種方案的比較:

使用高效SPE柱以提高SPE-04的分析靈敏度

博朗科技根據(jù)自動(dòng)固相萃取儀較高的輸液壓力,  開(kāi)發(fā)了固相萃取柱。該產(chǎn)品使用 HPLC級(jí)的高純度硅膠,  采用*的鍵合和表面處理工藝,  使得萃取效率大為提高,  填料 的用量也相應(yīng)大幅度減少。如下圖所示,  50毫克高效固相萃取柱的效果和500毫克普通 SPE柱的效果相當(dāng)。由于填料用量大幅度減少和添料表面不可逆吸附點(diǎn)的有效消除,  使 得洗脫更為容易。  使用0.5-2毫升淋洗液就可以把目標(biāo)組份*洗脫。

1.100毫克/6毫升  SPE  C18柱,

流速  20毫升/分;

2.  50毫克/3毫升  SPE  C18柱,

1 2 3 4 5 流速  10毫升/分;

3.100毫克/3毫升  SPE  C18柱, 流速  5毫升/分;

4.  500毫克/3毫升  常規(guī)SPE  C18柱

（品牌1）,  流速  5毫升/分;

5.  500毫克/3毫升  常規(guī)SPE  C18柱

（品牌2）,  流速  5毫升/分。

使用0.4毫升丙 酮的洗脫效果

藍(lán)色染料水溶液的萃取結(jié)果比較

較小的洗脫體積,  有利于樣品的富集。以SPE-04為例,  如果上樣5毫升,  用0.5毫升溶

劑洗脫收集,  便可以達(dá)到10倍的富集效果。