揭開細(xì)胞復(fù)制的秘密

研究細(xì)胞周期

上海滬峰是由留學(xué)美國(guó)多年的資深學(xué)者創(chuàng)辦的一家*企業(yè)，與中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)、華中農(nóng)業(yè)大學(xué)、哈爾濱獸醫(yī)研究所等多家高校及生物技術(shù)研究機(jī)構(gòu)建立了合作關(guān)系。公司以開發(fā)的動(dòng)物疾病診斷試劑、食品安全檢測(cè)試劑、人體疾病診斷試劑、環(huán)境監(jiān)測(cè)試劑、新型酶制劑、微生物制劑、蛋白質(zhì)產(chǎn)品、核苷酸產(chǎn)品、綠色水產(chǎn)藥品、小分子抗原抗體、基因重組抗原抗體等生物化學(xué)制品為主，以*的化企業(yè)經(jīng)營(yíng)理念、雄厚的研發(fā)實(shí)力、規(guī)范化的生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)、健全的銷售網(wǎng)絡(luò)、完善的技術(shù)服務(wù)體系和廣闊的國(guó)內(nèi)外合作網(wǎng)絡(luò)服務(wù)于，致力于生物制劑在的產(chǎn)業(yè)化。

Premo™ FUCCI Cell Cycle Sensor是基于兩個(gè)細(xì)胞周期調(diào)控蛋白geminin和Cdt1，它們分別與綠色和紅色熒光蛋白相融合。Cdt1和geminin蛋白的降解是時(shí)間上調(diào)控的，這樣G1期只存在Cdt1，G1/S期存在兩種蛋白，而S、G2和M期只存在geminin。因此，細(xì)胞核的熒光就從紅色（G1）變成綠色（S、G2、M），為監(jiān)控細(xì)胞周期進(jìn)程提供了一種簡(jiǎn)單的方法。
FUCCI系統(tǒng)是基于BacMam 2.0技術(shù)，它利用桿狀病毒來實(shí)現(xiàn)哺乳動(dòng)物細(xì)胞的轉(zhuǎn)導(dǎo)和瞬時(shí)表達(dá)。BacMam 2.0大大提高了這種基因?qū)肫脚_(tái)的效率和實(shí)用性。過去與BacMam 1.0不兼容的細(xì)胞類型（神經(jīng)元），或轉(zhuǎn)導(dǎo)效果不佳（一些干細(xì)胞、CHO）的細(xì)胞類型，現(xiàn)在也能通過簡(jiǎn)單的一步過程定量轉(zhuǎn)導(dǎo)。BacMam 2.0融合了新元件，大大增強(qiáng)了轉(zhuǎn)導(dǎo)效率和表達(dá)水平，故性能改善。

Premo™ FUCCI Cell Cycle Sensor實(shí)現(xiàn)了細(xì)胞周期進(jìn)程和細(xì)胞分裂的活細(xì)胞成像，它也與固定和透化處理兼容。這種細(xì)胞周期傳感器是即用型的，操作過程也很簡(jiǎn)單——只需將Premo™ FUCCI試劑加入您的細(xì)胞，孵育過夜，并利用熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀觀察即可。
追蹤DNA合成

Click-iT® EdU assay則是我們常用的BrdU分析的替代。在DNA合成過程中，核苷類似物EdU（5-乙炔-2’-脫氧尿苷）摻入新生的DNA鏈中。EdU不是通過抗體檢測(cè)，而是基于一個(gè)click反應(yīng)——銅催化的疊氮化物和炔烴之間的共價(jià)反應(yīng)。EdU核苷中含有炔烴，而Alexa Fluor或Pacific Blue熒光基團(tuán)上含有疊氮化物。利用成像技術(shù)、流式細(xì)胞術(shù)或高內(nèi)涵分析即可判定群體中S期細(xì)胞的比例。
Click-iT® EdU標(biāo)記的一個(gè)主要優(yōu)勢(shì)在于熒光疊氮化物（分子量<~1,000）的體積遠(yuǎn)小于BrdU抗體（分子量~150,000），這樣EdU可在溫和條件下?lián)饺耄Ａ袅丝乖暾?，從而?shí)現(xiàn)了下游的抗體分析。與BrdU檢測(cè)需要苛刻條件不同，Click-iT®檢測(cè)試劑只需要標(biāo)準(zhǔn)的固定和透化即可。