索萊寶革蘭氏染色液使用說明書

革蘭氏染色液使用說明書
貨號：G1060
規(guī)格：10ml/100ml
保存：陰涼處保存，保質(zhì)期3-6個月。
產(chǎn)品內(nèi)容:
結(jié)晶紫；碘液；95%酒精；蕃紅。
產(chǎn)品簡介：
革蘭氏染色法是細菌學(xué)中廣泛使用的一種鑒別染色法，通過結(jié)晶紫初染和碘液媒染后，在細胞壁內(nèi)形成了不溶于水的結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物，革蘭氏陽性菌細胞壁較厚，肽聚糖網(wǎng)層次較多且交聯(lián)致密，乙醇脫色時，肽聚糖脫水使孔徑縮小，故保留結(jié)晶紫-碘復(fù)合物在細胞膜上，呈紫色。革蘭氏陰性菌細胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚糖層薄且交聯(lián)度差，脫色后類脂外膜迅速溶解，縫隙加大，結(jié)晶紫與碘復(fù)合物溶出，因此乙醇脫色后再經(jīng)番紅復(fù)染，呈紅色。
操作步驟：
1. 涂片固定
菌液涂片時不可過于濃厚，干燥、固定。固定時通過火焰1-2次即可，不可過熱，以載玻片不燙手為宜。
2. 染色
一般包括初染、媒染、脫色、復(fù)染等四個步驟，具體操作方法是：
（1）加上結(jié)晶紫后，染色1分鐘，水洗。 （2）加上碘液后染色1分鐘，水洗。 （3）加上95%酒精,搖動玻片,根據(jù)涂片厚度,脫色約20-60秒，水洗，吸去水分。 （4）加上蕃紅后，染色1分鐘，水洗。 （5）吸干或在空氣中涼干后，油鏡鏡檢。 革蘭氏染色的關(guān)鍵在于嚴格掌握酒精脫色程度，如脫色過度，則陽性菌可被誤染為陰性菌；而脫色不夠時，陰性菌可被誤染為陽性菌。此外，菌齡也影響染色結(jié)果，如陽性菌培養(yǎng)時間過長，或已死亡及部分菌體自行溶解，都常呈陰性反應(yīng)。
3. 結(jié)果觀察：革蘭氏陰性菌呈紅色，革蘭氏陽性菌呈紫色。以均勻分散開的細菌的革蘭氏染色反應(yīng)為準，過于密集的細菌，常常呈現(xiàn)假陽性。
注意事項： 1．標本涂片不能太厚，嚴格按操作要求進行。若涂片較厚，應(yīng)延長脫色時間，直至不再出現(xiàn)紫色為止。 2．玻片通過火焰溫度不能太高。 3．碘液變透明，則不能使用。 4．水洗時動作要輕柔,沿載玻片對角線方向用洗瓶

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