革蘭氏染色液使用說明書
貨號:G1060
規(guī)格:10ml/100ml
保存:陰涼處保存,保質(zhì)期3-6個月。
產(chǎn)品內(nèi)容:
結(jié)晶紫;碘液;95%酒精;蕃紅。
產(chǎn)品簡介:
革蘭氏染色法是細菌學(xué)中廣泛使用的一種鑒別染色法,通過結(jié)晶紫初染和碘液媒染后,在細胞壁內(nèi)形成了不溶于水的結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物,革蘭氏陽性菌細胞壁較厚,肽聚糖網(wǎng)層次較多且交聯(lián)致密,乙醇脫色時,肽聚糖脫水使孔徑縮小,故保留結(jié)晶紫-碘復(fù)合物在細胞膜上,呈紫色。革蘭氏陰性菌細胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚糖層薄且交聯(lián)度差,脫色后類脂外膜迅速溶解,縫隙加大,結(jié)晶紫與碘復(fù)合物溶出,因此乙醇脫色后再經(jīng)番紅復(fù)染,呈紅色。
操作步驟:
1. 涂片固定
菌液涂片時不可過于濃厚,干燥、固定。固定時通過火焰1-2次即可,不可過熱,以載玻片不燙手為宜。
2. 染色
一般包括初染、媒染、脫色、復(fù)染等四個步驟,具體操作方法是:
(1)加上結(jié)晶紫后,染色1分鐘,水洗。 (2)加上碘液后染色1分鐘,水洗。 (3)加上95%酒精,搖動玻片,根據(jù)涂片厚度,脫色約20-60秒,水洗,吸去水分。 (4)加上蕃紅后,染色1分鐘,水洗。 (5)吸干或在空氣中涼干后,油鏡鏡檢。 革蘭氏染色的關(guān)鍵在于嚴格掌握酒精脫色程度,如脫色過度,則陽性菌可被誤染為陰性菌;而脫色不夠時,陰性菌可被誤染為陽性菌。此外,菌齡也影響染色結(jié)果,如陽性菌培養(yǎng)時間過長,或已死亡及部分菌體自行溶解,都常呈陰性反應(yīng)。
3. 結(jié)果觀察:革蘭氏陰性菌呈紅色,革蘭氏陽性菌呈紫色。以均勻分散開的細菌的革蘭氏染色反應(yīng)為準,過于密集的細菌,常常呈現(xiàn)假陽性。
注意事項: 1.標本涂片不能太厚,嚴格按操作要求進行。若涂片較厚,應(yīng)延長脫色時間,直至不再出現(xiàn)紫色為止。 2.玻片通過火焰溫度不能太高。 3.碘液變透明,則不能使用。 4.水洗時動作要輕柔,沿載玻片對角線方向用洗瓶
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