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所需儀器：XL03RH型控溫離心機(jī)（低速冷凍離心機(jī)，可使用24*15ml離心管，水平轉(zhuǎn)子）；抽血注射器（大小與抽血體積相一致）
試劑：Optiprep；Tricine-緩沖鹽溶液（TBS,僅小鼠血）0.85%（質(zhì)量濃度）NaCl，10mmol/L Tricine-NaOH（ph = 7.4）。
方法：樣品收集
1） 收集人外周血，用EDTA（1mmol/L）或檸檬酸鹽（3.8%，質(zhì)量濃度）抗凝（為了避免對結(jié)果的影響，避免使用肝素）。
2） 用CO2麻醉大鼠，收集血液（約10ml），把血液收集到含有1ml 3.8%（質(zhì)量濃度）檸檬酸鹽的10ml注射器里。
3） 用CO2麻醉小鼠，收集血液，把血液收集到含有0.1ml 3.8%（質(zhì)量濃度）檸檬酸鹽的2ml注射器里。
細(xì)胞的分級分離
1） 取1.25ml（用于人血）或1.26ml（用于大鼠血）Optiprep與10ml的血液輕輕混血（反復(fù)顛倒）。對于小鼠血液（0.5~1.0ml），5.0ml TBS與1.5ml Optiprep混合，然后取該混合液5ml與小鼠血液混合。
2） 在頂上鋪少量生理鹽水（0.5ml），它可以防止單核細(xì)胞在空氣/介質(zhì)分界面形成區(qū)帶，也避免細(xì)胞在血漿/離心管壁交匯處堆積。
3） 在20℃、1000~1200g離心30分鐘
4） 用吸管收集彎月面的細(xì)胞，除去距沉淀2cm以上的所有上清液。
說明：大多數(shù)細(xì)胞在血漿/生理鹽水分界面處的區(qū)帶里，但10%~15%在沉淀上面的血漿里。
湖南湘立研制生產(chǎn)的幾款醫(yī)用離心機(jī)可以用來進(jìn)行細(xì)胞分離，如DL5M/TDL5M兩種型號的低速冷凍離心機(jī)可用來進(jìn)行干細(xì)胞實(shí)驗(yàn)。XL03RH型控溫離心機(jī)（低速冷凍離心機(jī)）可用來進(jìn)行溫度敏感型人體細(xì)胞分離。
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