四大酵母培養(yǎng)基的配置

一、目的要求

了解合成培養(yǎng)基、半合成培養(yǎng)基和天然培養(yǎng)基的配制原理。
　　學習和掌握麥芽汁培養(yǎng)基、馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基、豆芽汁葡萄糖培養(yǎng)基和察氏培養(yǎng)基的配制方法。

二、基本原理 

麥芽汁培養(yǎng)基和馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基被廣泛用于培養(yǎng)酵母菌和霉菌。馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基有時也可用于培養(yǎng)放線菌。豆芽汁葡萄糖培養(yǎng)基也是培養(yǎng)酵母菌及霉菌的一種優(yōu)良培養(yǎng)基。察氏培養(yǎng)基主要用于培養(yǎng)霉菌觀察形態(tài)用。麥芽汁培養(yǎng)基為天然培養(yǎng)基，馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基和豆芽汁葡萄糖培養(yǎng)基二者均為半合成培養(yǎng)基，而察氏培養(yǎng)基則為合成培養(yǎng)基。培養(yǎng)基配方中出現(xiàn)的自然pH系指培養(yǎng)基不經(jīng)酸、堿調(diào)節(jié)而自然呈現(xiàn)的pH。 

三、實驗材料 

（一）  藥品   
葡萄搪、蔗糖、NaN0₃、K₂HP0₄、KCl、MgSO₄·7H₂O，F(xiàn)eS0₄、瓊脂。 
　?。ǘ?nbsp; 儀器   
天平、高壓蒸汽滅菌鍋。  
　　（三）  玻璃器皿   
移液管、試管、錐形瓶、燒杯、量筒、培養(yǎng)皿、玻璃漏斗等。  
　?。ㄋ模?nbsp; 其他物品   
藥匙、pH試紙、稱量紙、記號筆、棉花、紗布、線繩、塑料試管蓋、牛皮紙、報紙、新鮮麥芽汁、黃豆芽、馬鈴薯等。

四、實驗內(nèi)容 

（一）  麥芽汁培養(yǎng)基的配制 

1．培養(yǎng)基成分   
新鮮麥芽汁一般為10-15波林。 

2．配制方法   

（1）  用水將大麥或小麥洗凈，用水浸泡6-12h，置于15℃陰涼處發(fā)芽，上蓋紗布，每日早、中、晚淋水一次，待麥芽伸長至麥粒的兩倍時，讓其停止發(fā)芽，曬干或烘干，研磨成麥芽粉，貯存?zhèn)溆谩?nbsp;  
　?。?）  取一份麥芽粉加四份水，在65℃水浴鍋中保溫3-4h，使其自行糖化，直至糖化*（檢查方法是取0.5ml的糖化液，加2滴碘液，如無藍色出現(xiàn)，即表示糖化*）。   
　　（3）  糖化液用4-6層紗布過濾，濾液如仍混濁，可用雞蛋清澄清（用一個雞蛋清，加水20 ml，調(diào)勻至生泡沫，倒入糖化液中，攪拌煮沸，再過濾）。   
　?。?）  用波美比重計檢測糖化液中糖濃度，將濾液用水稀釋到10-15波林，調(diào)pH至6．4。如當?shù)赜衅【茝S，可用未經(jīng)發(fā)酵，未加酒花的新鮮麥芽汁，加水稀釋到10-15波林后使用。   
　?。?）  如配固體麥芽汁培養(yǎng)基時，加入2％瓊脂，加熱融化，補充失水。   
　?。?）  分裝、加塞、包扎。   
　?。?）  高壓蒸汽滅菌  100 Pa滅菌20 min。 

（二）  馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基的配制

1．培養(yǎng)基成分   
　　馬鈴薯　　　20g   
　　葡萄糖　　　2 g   
　　瓊脂　　　　1.5-2g   
　　水　　　　　100ml   
　　自然pH

　　2．配制方法
　?。?）  配制20％馬鈴薯浸汁  取去皮馬鈴薯200g，切成小塊，加水1000ml。80℃浸泡lh，用紗布過濾，然后補足失水至所需體積。100 Pa滅菌20 min。即成20％馬鈴薯浸汁，貯存?zhèn)溆谩?nbsp;  
　?。?）  配制時，按每100 ml馬鈴薯浸汁加入2g葡萄糖，加熱煮沸后加入2g瓊脂，繼續(xù)加熱融化并補足失水。   
　　（3）  分裝、加塞、包扎。   
　?。?）  高壓蒸汽滅菌  100 Pa滅菌20 min。

 （三）豆芽汁葡萄糟培養(yǎng)基的配制  

1．培養(yǎng)基成分   
　　黃豆芽　　　10g   
　　葡萄糖　　　5g   
　　瓊脂　　　　1.5-2g   
　　水　　　　　100ml   
　　自然pH 
 
　　2．配制方法
　?。?）  稱新鮮黃豆芽10g，置于燒杯中，再加入100 ml水，小火煮沸30 min，用紗布過濾，補足失水，即制成10％豆芽汁。   
　?。?）  配制時，按每100 ml10％豆芽汁加入5g葡萄糖，煮沸后加入2 g瓊脂，繼續(xù)加熱融化，補足失水。   
　?。?）  分裝、加塞、包扎。   
　　（4）  高壓蒸汽滅菌  100 Pa滅菌20 min。

（四）察氏（czapck）培養(yǎng)基的配制

1．培養(yǎng)基成分   
　　蔗糖　　　　　　　3g   
　　NaN0₃　　　　　0.3g   
　　K2HP0₄  　　　　0.1g   
　　KCl 　　　　　　 0.05g   
　　MgSO₄·7H₂O    　0.05 g   
　　FeS0₄ 　　　　　0.001 g   
　　瓊脂　　　　　　1.5-2g   
　　蒸餾水　　　　　100ml   
　　自然pH    
 
　　2．配制方法
　?。?）  稱量及溶化  量取所需水量約2／3左右加入到燒杯中，分別稱取蔗糖、NaNO₃ 、K₂HP0₄ 、KCl、MgSO₄。依次逐一加入水中溶解。按每100 ml培養(yǎng)基加入1ml 0.1％的FeS0₄溶液。   
　　（2）  定容  候藥品全部溶解后，將溶液倒入量筒中，加水至所需體積。   
　?。?）  加瓊脂  加入所需量瓊脂，加熱融化，補足失水。   
　　（4）  分裝、加塞、包扎。   
　?。?）  高壓蒸汽滅菌 100 Pa滅菌20 min。

五、實驗報告內(nèi)容 

記錄你所配制培養(yǎng)基的名稱及成分。