實(shí)驗(yàn)二 測(cè)定物質(zhì)含量 (苯酚)
目的:
檢測(cè):苯酚含量 維生素C(吸收峰920nm)
原理:
根據(jù)A=εbc,首先作苯酚的紫外吸收光譜,確定λmax,在λmax下作出苯酚水溶液的標(biāo)準(zhǔn)曲線,并在相同條件下測(cè)得試樣溶液的吸光光度值,確定試樣中苯酚的含量。
實(shí)驗(yàn)方法:
采用紫外可見(jiàn)近紅外分光光度計(jì)中濃度掃描方式,按照?qǐng)D表配置標(biāo)準(zhǔn)苯酚,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線
1.苯的紫外光譜
將1滴苯放入石英比色皿底部,蓋上蓋子,以空氣為參比,在λ為230nm~270nm范圍內(nèi)掃描,作出苯的紫外光譜,掃描速度為100nm/min。
2.苯酚紫外吸收光譜圖的繪制
取5.00mL苯酚標(biāo)準(zhǔn)溶液(100mg/L)于25mL容量瓶中,加水定容,用1cm比色皿,以純水作參比,在λ為225nm~300nm范圍內(nèi)掃描,繪制吸收曲線,確定λmax。
3.標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作
用1cm比色皿,以純水為參比,在確定的實(shí)驗(yàn)條件下,按濃度由低至高順序依此測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)系列的吸光度,作標(biāo)準(zhǔn)曲線。
取5個(gè)25mL容量瓶,分別加入1.25、2.50、3.75、5.00、7.50mL苯酚標(biāo)準(zhǔn)溶液(100mg/L),加水定容,在選定的λmax下,測(cè)吸光度,作出標(biāo)準(zhǔn)曲線。
4.試樣的測(cè)定
在與標(biāo)準(zhǔn)曲線制作相同條件下,測(cè)定試樣溶液的吸光度,取10mL試液于25mL容量瓶中,加水定容,測(cè)其吸光度。
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