鯉魚卵黃蛋白原ELISA試劑盒標(biāo)本及采集、貯運因素

鯉魚卵黃蛋白原ELISA試劑盒標(biāo)本及采集、貯運

（1）鯉魚卵黃蛋白原ELISA試劑盒嚴(yán)重溶血，以HRP 為標(biāo)記的ELISA 測定中，殘留在孔內(nèi)的血紅蛋白具有過氧化物酶樣活性，催化底物顯色造成假陽性； 
（2）混有紅細胞的血清 易沉淀或附著在聚乙烯孔內(nèi)不易洗凈；
（3）如有細菌污染，菌體中可能含有內(nèi)源性HRP，也會產(chǎn)生假陽性反應(yīng)； 
（4）標(biāo)本凝固不全，有時為了爭取時間快速檢測，常在血液還未開始凝固時即強行離心分離血清，使血清中仍殘留部分纖維蛋白原，在ELISA 測定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊，易造成假陽性結(jié)果； 
（5）采血試管洗滌不*、反復(fù)使用易交叉污染； 
（6）塑料試管能吸附抗原物質(zhì) ，樣本久置在塑料管內(nèi)會使樣本內(nèi)抗原含量下降造成假陰性。 
ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1）目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于（競爭法則淺于）陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2）以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3）以P／N值（陽性孔OD值／陰性孔OD值）大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4）定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。