protein A瓊脂糖凝膠與proteinG的區(qū)別

蛋白A、蛋白G是微生物來源的天然蛋白質(zhì)，可以和哺乳動物的免疫球蛋白結(jié)合,基于這一特性，蛋白A、蛋白G的主要應(yīng)用是在：   
1 純化抗體: 將這些蛋白偶聯(lián)于支持物上，提供了純化抗體的有效方法。   
2 免疫沉淀(immunoprecipitation): 利用蛋白A、蛋白G和免疫球蛋白的Fc段的結(jié)合，把Ag-Ab復(fù)合物分離出來，從而達到從蛋白復(fù)合物中分離出特定蛋白進行下一步的研究分析或者研究蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)之間的相互作用。   
3 去除或減少非特異性背景： 如免疫沉淀技術(shù)中在加入特異性抗體前加protein A/G beads到細胞裂解液中，以減低背景。   
蛋白A、蛋白G與不同的免疫球蛋白的結(jié)合能力并不一樣，它們受到后者的來源及亞類的影響。 

protein A瓊脂糖凝膠與proteinG瓊脂糖凝膠的主要區(qū)別：
1.跟免疫球蛋白結(jié)合的機理不同
Protein A :  天然的Protein A，42kDa，含有四個Ig Fc結(jié)合位點，其中2個是有活性的。 而用于純化抗體的，一般是重組的protein A，含有4個Ig Fc區(qū)域結(jié)合位點。    
Protein G：  是由G群鏈球菌株產(chǎn)生的一種細胞壁成分，可結(jié)合很多種免疫球蛋白的Fc部分。Protein G對不同種屬Ig或同一種屬的不同型Ig均表現(xiàn)出不同的親和力。   
和Protein A對比Protein G對于某些亞型的IGG抗體結(jié)合力更強。Protein G能結(jié)合所有的人和鼠的IGG抗體亞型，包括鼠的IGG1。Protein G也可以與小鼠的IGG2a和IGG2b結(jié)合，而Protein A則不能。

2.純化對象的區(qū)別
Protein G是從G類Streptococci細菌中分離出來的胞壁蛋白，與多數(shù)哺乳動物的IgG Fc段結(jié)合(包括：人、山羊、綿羊、兔、豚鼠、馬、豬、猴、小鼠等)，分子量：25kDa。Protein G可用于純化不能與Protein A很好結(jié)合的哺乳動物單抗和多抗IgG的純化。相對于Protein A，Protein G對于大多數(shù)哺乳動物的IgG有著更高的親和力，尤其是對于IgG的亞基，如人 IgG3，小鼠IgG1和鼠 IgG2a。與Protein A不同，Protein G不與狗IgG結(jié)合、不結(jié)合人IgM，IgD，或IgA。

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