多肽合成常見問題及解答

1. 如何保存合成的多肽？

多肽在-20℃很穩(wěn)定，特別是冷凍干燥并保存在干燥器中，在將它們暴露于空氣之前， 冷凍干燥多肽可以放于室溫。這將是濕度影響減少，當無法冷凍干燥時，的方法是以小的工作樣量存放。

對于含Cys, Met orTrP的多肽，脫氧緩沖劑對其溶解*，因為這種多肽可易空氣氧化， 在封瓶前，慢慢流過多肽的氮氣或氬氣也會降低氧化作用。含Gln或Asn的多肽也容易降解，所有這些肽與不含這些有問題解苷的那些肽相比，生命期有限。

2. 多肽的溶解性怎樣？都溶于哪些溶劑？

大多數(shù)肽的溶劑是超純抽氣水。稀乙酸或氨水分別對于堿性或酸性多肽的溶解很重要。這些方法不溶的多肽， 需要DMF（二甲基甲酰胺）、脲、guanidinium（胍鹽）、chloride（氯化物）或acetonitrile（乙腈）來溶解，這些溶劑可能某些實驗有副作用。所以我們建議設計多肽時要加注意。

殘基Ala, Cys , Ile, Leu, Met, Phe和Val將全增加多肽的溶解難度。

3. 多肽的保存如何操作？

包裝 1mg或更少的多肽按凈重包裝，聲明的小瓶重不含相關抗離子和水。 例如，氨基酸分析決定的肽含量是80%， 在1mg樣品中，那么瓶中毛重是1.25mg。

大量的多肽以毛重算。標出的重量含相關抗離子和水， 例如，25mg樣品中肽百分比為90%，那么，實際肽量為25mg×90%=22.5mg

不要把肽含量和純度搞混了。肽的純度可能是100%， 而肽含量相關帶電基團（如Arg, Lys ）的抗離子量和肽親水性決定。這是合成肽的本身特性。

所有產(chǎn)品應存于冰箱， 為-20℃。多數(shù)肽以此方法可以存放幾年不變。

溶液肽遠比凍干形式不穩(wěn)定，溶液應為中性pH(pH5-7), -20℃保存的，為避免樣品的反復凍融， 分成小樣存放。一份樣品融凍后未用完， 應扔掉，細菌降解有時會成為溶液肽的麻煩， 為克服此，肽應溶于無菌水， 或肽溶液用0.2μ M濾膜過濾。

4. 如何重建多肽重建過程如何操作？

多數(shù)肽溶于無菌蒸溜水。初次溶解時，要注意使初始濃度比要求濃度大，如果多肽僅有限溶解性， 這便允許加入其它溶解劑或緩沖鹽。

如果多肽在水中的溶解性有限，有幾種選擇可幫助溶解：

對堿性肽用稀乙酸（含Arg , Lys , His）

酸性肽用稀氨水（含Asp, lu）

對極疏水的肽用10%有機修飾物（acetonitrile , Methanol）

極不溶的肽用DM50或DMF

guanidine hydrochloride或脲的濃溶液也很有用， 與上述方法合用， 聲處理也是溶解多肽的有效手段。