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色譜柱的使用和維護(hù)

來源:RESTEK 瑞思泰康科技(北京)有限公司   2015年12月17日 14:16  
   色譜柱的正確使用和維護(hù)十分重要,稍有不慎就會降低柱效縮短使用壽命甚至損壞在色譜操作過程中,需要注意,以維護(hù)色譜柱避免壓力和溫度的急劇變化及任何機械震動溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會影響柱內(nèi)的填充狀況;柱壓的突然升高或降低也會沖動柱內(nèi)填料,因此在調(diào)節(jié)流速時應(yīng)該緩慢進(jìn)行,在閥進(jìn)樣時閥的轉(zhuǎn)動不能過緩。

 

  色譜柱使用過程中,如果壓力升高,一種可能是燒結(jié)濾片被堵塞,這時應(yīng)更換濾片或?qū)⑵淙〕鲞M(jìn)行清洗;另一種可能是大分子進(jìn)入柱內(nèi),使柱頭被污染;如果柱效降低或色譜峰變形,則可能柱頭出現(xiàn)塌陷,死體積增大在后兩種情況發(fā)生時,小心擰開柱接頭,用潔凈小鋼將柱頭填料取出1~2mm高度(注意把被污染填料取凈)再把柱內(nèi)填料整平然后用適當(dāng)溶劑濕潤的固定相(與柱內(nèi)相同)填滿色譜柱,壓平,再擰緊柱接頭這樣處理后柱效能得到改善,但是很難恢復(fù)到新柱的水平柱子失效通常是柱端部分,在分析柱前裝一根與分析柱相同固定相的短柱(5~30mm),可以起到保護(hù)延長柱壽命的作用采用保護(hù)柱會損失一定的柱效,這是值得的 通常色譜柱壽命在正確使用時可達(dá)2年以上以硅膠為基質(zhì)的填料,只能在pH2~9范圍內(nèi)使用柱子使用一段時間后,可能有一些吸附作用強的物質(zhì)保留于柱頂,特別是一些有色物質(zhì)更易看清被吸著在柱頂?shù)奶盍仙闲碌纳V柱在使用一段時間后柱頂填料可能塌陷,使柱效下降,這時也可補加填料使柱效恢復(fù)每次工作完后,用洗脫能力強的洗脫液沖洗,例如ODS柱宜用甲醇沖洗至基線平衡當(dāng)采用鹽緩沖溶液作流動相時,使用完后應(yīng)用無鹽流動相沖洗含鹵族元素(fu氯溴)的化合物可能會腐蝕不銹鋼管道,不宜長期與之接觸裝在HPLC儀上柱子如不經(jīng)常使用,應(yīng)每隔4~5天開機沖洗15分鐘。

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