為什么大多數(shù)細胞培養(yǎng)需要用二氧化碳培養(yǎng)箱
一般細胞培養(yǎng)液的pH在7.0-7.4之間,由于碳酸鹽pH緩沖系統(tǒng)是一種生理pH緩沖系統(tǒng)(它是人體血液中zui重要的pH緩沖系統(tǒng)),大多數(shù)培養(yǎng)液用它來保持穩(wěn)定的pH。用粉末配制培養(yǎng)液時,常常需要加入一定量的碳酸氫鈉。
對大多數(shù)以碳酸鹽作為pH緩沖系統(tǒng)的培養(yǎng)液而言,為了維持穩(wěn)定的pH,培養(yǎng)箱中的二氧化碳需要維持在2-10%之間,以保持培養(yǎng)液中溶解的二氧化碳 的濃度。同時細胞培養(yǎng)的器皿需要一定程度的透氣,以便于氣體的交換。 (島韓二氧化碳培養(yǎng)箱)
是不是采用其他pH緩沖系統(tǒng)就不需要二氧化碳培養(yǎng)箱了呢?人們發(fā)現(xiàn)由于空氣中的二氧化碳濃度很低,如果細胞不在二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng),培養(yǎng)液中的HCO3-會被耗盡,這樣會影響細胞的正常生長。所以大部分動物細胞的培養(yǎng),還是需要二氧化碳培養(yǎng)箱。細胞培養(yǎng)液中常附加其他的pH緩沖系統(tǒng),比如HEPES緩沖系統(tǒng),來增加pH緩沖能力。HEPES在pH7.2-7.4之間有很強的緩沖能力,當透氣的培養(yǎng)器皿被拿到二氧化碳培養(yǎng)箱外面的時候,由于空氣中二氧化碳濃度很低,培養(yǎng)液中碳酸鹽緩沖系統(tǒng)就會失去效果,這時候HEPES緩沖系統(tǒng)就能繼續(xù)保持 pH的穩(wěn)定。
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