果蔬殘留農(nóng)藥的氣質(zhì)聯(lián)用檢測(cè)方法

　結(jié)合當(dāng)前我國(guó)對(duì)果蔬農(nóng)藥檢驗(yàn)要求的標(biāo)準(zhǔn)，收集了很多關(guān)于農(nóng)藥殘留的文獻(xiàn)和資料，終決定采用氣質(zhì)聯(lián)用的檢測(cè)方法，建立了對(duì)果蔬中殘留農(nóng)藥篩選和鑒定的方法，本方法在篩選時(shí)，通過兩個(gè)特征離子對(duì)農(nóng)藥進(jìn)行篩選和定性，當(dāng)檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性時(shí)，根據(jù)相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)要提高特征離子數(shù)，通過離子時(shí)間的豐度進(jìn)行對(duì)比，對(duì)樣品做進(jìn)一步確證，另外也可以結(jié)合農(nóng)藥在GC柱上的停留時(shí)間進(jìn)行對(duì)比，以此輔助鑒別。這種方法也能用于檢測(cè)單個(gè)農(nóng)藥呈陽(yáng)性時(shí)的定性。 
　　1 實(shí)驗(yàn)設(shè)備和試劑 
　　1.1 實(shí)驗(yàn)設(shè)備 
　　GC-MS聯(lián)用儀為美國(guó)公司的8000TOP-VOYAGER；組織搗碎機(jī)為美國(guó)的23BL79；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器為上海的RE-52；高速均質(zhì)器為德國(guó)的ULTRA-TURRAXT25；快速旋流濃縮儀為美國(guó)公司的TurboVap500。 
　　1.2 實(shí)驗(yàn)試劑 
　　二氯甲烷、甲苯石油醚、石油醚（沸程50度左右）、乙酸乙酯、氯化鈉、無水硫酸鈉（通過650度高溫灼燒4個(gè)小時(shí)，放入干燥器中備用）、丙酮，所有試劑都為分析純。農(nóng)藥試樣購(gòu)于國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中心，把標(biāo)準(zhǔn)品配置成濃度為1g/L的儲(chǔ)備液，依照實(shí)際實(shí)驗(yàn)的需要，再稀釋成標(biāo)準(zhǔn)品混合工作溶液。 
　　2 實(shí)驗(yàn)過程 
　　2.1 提取和凈化 
　?。?）首先提取200克果蔬試驗(yàn)品放入組織搗碎機(jī)中，充分絞碎并混合均勻，然后以從中提取出10克放入100毫升的離心管內(nèi)，加入25mL×2丙酮，高速均質(zhì)兩分鐘，在3000r/min下離心5分鐘，合并兩次上清液，后通過過濾放入250毫升的分液漏斗內(nèi)。 
　?。?）向漏斗中添加20毫升正已烷、20毫升二氯甲烷，充分搖勻，時(shí)間為1分鐘；把分液漏斗中的上層有機(jī)相移至三角瓶?jī)?nèi)，下層水相放入另一個(gè)漏斗中，然后向裝有水相的漏斗中放入2克氯化鈉，充分搖勻直至溶解，再放入20mL×2二氯甲烷振搖1分鐘，然后同上層有機(jī)相融合到一起，后加入適量的無水硫酸鈉，放置約30分鐘。 
　?。?）將脫水后提取液，通過過濾放入旋流儀的濃縮瓶?jī)?nèi)，用20mL×2二氯甲烷洗滌硫酸鈉也放入濃縮瓶?jī)?nèi)，設(shè)置旋流儀溫度為30度，扇葉轉(zhuǎn)動(dòng)速度為4000r/min，冷凝套中的水溫在5度到10度之間，在上述要求下取濃縮液1毫升，供下述實(shí)驗(yàn)用。 
　　2.2 GC-MS設(shè)定 
　　2.2.1 GC條件 
　　色譜柱DB35MS，25m×0.25mm×0.25μm，在汽化室同分析柱之間連接1米長(zhǎng)的預(yù)柱；初溫度為50度，以每分鐘20度的速度把溫度上升為120度，再以每分鐘3度的速度升溫至280度，保持12分鐘；載氣為高純氦，恒流方式為每分鐘1毫升；進(jìn)樣口溫度為260度，接口溫度為250度；不分流進(jìn)樣1分鐘，進(jìn)樣2微升。 
　　2.2.2 MS條件 
　　EI方式，電子能量70eV，離子源溫度為200度，測(cè)量電壓為350伏，全掃描檢測(cè)質(zhì)量范圍50u到550u，每次掃描的時(shí)間為0.45秒；選擇離子檢驗(yàn)是依照被檢測(cè)物品的保留時(shí)間決定的，在對(duì)應(yīng)的時(shí)間窗內(nèi)設(shè)置特征離子，每次掃描時(shí)間為0.1秒，溶劑延時(shí)5分鐘。 
　　2.3 測(cè)定 
　　依照上述GC-MS的設(shè)定，首先注入質(zhì)量濃度約2mg/L農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，明確被測(cè)農(nóng)藥在總離子流圖上的RT值，同時(shí)矯正農(nóng)藥檢測(cè)離子的時(shí)間窗。為了更好的提高試驗(yàn)的度，同時(shí)改善一次分析對(duì)不能較好分離物質(zhì)的檢測(cè)，設(shè)定兩個(gè)保留時(shí)間窗掃描程序，在任何一個(gè)時(shí)間窗內(nèi)都要放幾個(gè)選擇離子，把總離子流圖中RT相同的放入兩個(gè)掃描程序時(shí)間窗，對(duì)樣品的進(jìn)樣進(jìn)行對(duì)比分析。 
　　注入被測(cè)樣品，在對(duì)應(yīng)的時(shí)間窗內(nèi)，如果沒有特征離子或離子豐度比同標(biāo)準(zhǔn)值之間差距較大，視為未檢出；如果特征離子間豐度比同相關(guān)規(guī)定有出入，要采取其它方法再次進(jìn)行檢測(cè)，在確證難分離的農(nóng)藥時(shí)，可以依照傳統(tǒng)的農(nóng)殘分析方法，排除干擾物；調(diào)整GC條件或更換GC毛細(xì)管柱，結(jié)合農(nóng)藥在色譜柱上的RT進(jìn)行識(shí)別。如果在對(duì)應(yīng)時(shí)間窗內(nèi)特征離子全部檢出，離子間豐度比也符合相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，就可以認(rèn)為結(jié)果呈陽(yáng)性。在需要時(shí)也可以選擇不同GC檢測(cè)器做輔助鑒別和定量，提高檢測(cè)的性。如下表1為殘留農(nóng)藥的檢測(cè)數(shù)據(jù)。 
　　3 結(jié)果和討論 
　　3.1 色譜柱的選擇 
　　GC-MS用于農(nóng)藥殘留物的檢測(cè)常采用EI-SIR方式，其靈敏度和度很好，但是MS確證能力稍微薄弱，為了避免這個(gè)問題，可以替換不同極性色譜柱，結(jié)合保留的時(shí)間起到輔助辨別的效果。通過本研究能夠發(fā)現(xiàn)，任何一種色譜柱都不能把農(nóng)藥*分離來，在真正的檢測(cè)中，把農(nóng)藥同時(shí)檢測(cè)出也是不可能的，只要在某一色譜柱上的難分離對(duì)在另一色譜柱上能分開即可。 
　　3.2 方法的比較以及對(duì)結(jié)果的影響 
　　大部分的水果蔬菜其含有的水分是非常多的，脂肪性也較低，組成比較簡(jiǎn)單，除了本文所采用的方法之外，也對(duì)比了乙酸乙酯方法，乙酸乙酯方法的操作簡(jiǎn)單，回收率相對(duì)也較好，但是沒有經(jīng)過任何凈化，在分析成分復(fù)雜的蔬菜時(shí)，對(duì)檢測(cè)儀器的污染度很高，因此為了儀器的可靠性和穩(wěn)定性，還是應(yīng)該使用本文所闡述的方法；另外每檢測(cè)75個(gè)樣品左右就要*清理玻璃襯管，檢測(cè)400個(gè)樣品左右就要更換預(yù)柱，也可以把分析柱頭切除40厘米左右。 
　　4 結(jié)語 
　　通過上述分析能夠看出，通過建立農(nóng)藥殘留篩選、定量的方法，對(duì)農(nóng)藥進(jìn)行統(tǒng)一的凈化和提取，極大的增強(qiáng)了農(nóng)藥檢測(cè)的效率。在檢測(cè)中，對(duì)農(nóng)藥應(yīng)用于不同的試樣進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)，對(duì)在不同色譜柱上停留的時(shí)間做了觀察，明確了的檢測(cè)方法和農(nóng)藥的選擇離子，對(duì)在不同S/N水平時(shí)選擇離子間豐度比與標(biāo)準(zhǔn)的符合性做了詳細(xì)的評(píng)價(jià)，終得出農(nóng)藥的檢出限符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的結(jié)論。