小鼠轉(zhuǎn)錄因子T-bet(T-bet)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說明書

　　本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命，追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經(jīng)營中始終秉承：遵紀(jì)守法，嚴(yán)于律己，寬仁以待，敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn)，以過硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來維護(hù)和拓展市場，較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏，是我們的發(fā)展目標(biāo)，本生，您信任的合作伙伴!本生試劑盒

　　?小鼠轉(zhuǎn)錄因子T-bet(T-bet)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說明書主要包括以下內(nèi)容?：

　　貨號(hào)：BS-9406 小鼠轉(zhuǎn)錄因子T-bet(T-bet)ELISA試劑盒

　　一、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備

　　?試劑盒保存與平衡?：試劑盒應(yīng)保存在2-8℃條件下，使用前需室溫平衡20分鐘?。

　　?實(shí)驗(yàn)器材準(zhǔn)備?：準(zhǔn)備必要的實(shí)驗(yàn)器材，如酶標(biāo)儀(450nm)、高精度加樣器及槍頭、37℃恒溫箱等?。

　　二、樣本收集與處理

　　?血清?：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管收集血液，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘分離血清和紅細(xì)胞?。

　　?血漿?：采用EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝，3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清?。

　　?細(xì)胞上清液?：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物?1。

　　?組織勻漿?：將組織加入適量生理鹽水搗碎，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。若樣本不及時(shí)檢測，應(yīng)按一次用量分裝并凍存于-20℃?。

　　三、實(shí)驗(yàn)步驟

　　?加樣?：

　　在酶標(biāo)包被板上設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測樣品孔和空白孔。

　　標(biāo)準(zhǔn)品設(shè)定5個(gè)濃度點(diǎn)，每個(gè)濃度設(shè)定平行孔，加入50微升不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品。

　　待測樣品孔先加樣品稀釋液40微升，再加待測樣品10微升(最終稀釋度為5倍)。

　　空白孔加入50微升蒸餾水?。

　　?溫育?：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘?。

　　?配液?：將濃縮洗滌液按倍數(shù)稀釋后備用?。

　　?洗滌?：揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，重復(fù)5次，拍干?。

　　?加酶?：每孔(除空白孔外)加入酶標(biāo)試劑50微升?。

　　?再次溫育?：操作同第一次溫育步驟?。

　　?再次洗滌?：操作同洗滌步驟?。

　　?顯色?：每孔先加入顯色劑A50微升，再加入顯色劑B50微升，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘?。

　　?終止?：每孔加終止液50微升，終止反應(yīng)(顏色由藍(lán)轉(zhuǎn)黃)?。

　　?測定?：以空白孔調(diào)零，在450nm波長下依序測量各孔的吸光度(OD值)，測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行?。

　　四、注意事項(xiàng)

　　試劑盒僅用于科學(xué)研究，不得用于醫(yī)學(xué)診斷?。

　　實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中，密封并低溫干燥保存?。

　　嚴(yán)格按照說明書操作，避免交叉污染和試劑浪費(fèi)?3。

　　五、實(shí)驗(yàn)室自備器材試劑

　　96孔讀板儀器

　　自動(dòng)洗板機(jī)

　　移液器和槍頭(建議使用多通道移液器/排槍)

　　Eppendorf管

　　洗板緩沖液(如neutral PBS或TBS，試劑盒內(nèi)提供足量，如需額外緩沖液可參考配方配制)?4請(qǐng)按照說明書嚴(yán)格操作，以確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。