如何使用奧林巴斯顯微鏡CX43暗場(chǎng)功能

奧林巴斯顯微鏡CX43具備暗場(chǎng)觀察功能，適用于觀察透明或低對(duì)比度的樣品，如活細(xì)胞、微生物、細(xì)胞膜等。暗場(chǎng)顯微鏡通過(guò)特殊的光學(xué)配置，在樣品上投射斜向光線，使樣品在散射光下顯示出高對(duì)比度的圖像，而背景則保持黑暗。這種功能可以讓觀察者看到那些在常規(guī)明場(chǎng)條件下無(wú)法清晰觀察的細(xì)微結(jié)構(gòu)。以下是如何使用奧林巴斯CX43顯微鏡的暗場(chǎng)功能的步驟：

一、準(zhǔn)備工作

1. 確保設(shè)備穩(wěn)定：

• 將顯微鏡放置在一個(gè)穩(wěn)定的工作臺(tái)上，確保在觀察過(guò)程中不會(huì)有震動(dòng)影響。

2. 清潔樣品和顯微鏡：

• 使用清潔的玻璃載片和蓋玻片準(zhǔn)備樣品，避免污漬或灰塵影響圖像質(zhì)量。

• 清潔顯微鏡的物鏡、目鏡以及鏡頭等部件，確保無(wú)塵污漬，以避免影響觀察效果。

二、暗場(chǎng)觀察模式的設(shè)置

1. 選擇適當(dāng)?shù)奈镧R：

• 暗場(chǎng)觀察通常使用較低倍率的物鏡（如10x或20x），以便獲得足夠的視野和亮度。

• 需要注意，CX43顯微鏡支持不同倍率的物鏡，可以根據(jù)觀察的樣品選擇合適的物鏡。

2. 安裝暗場(chǎng)聚光鏡：

• 奧林巴斯CX43顯微鏡需要使用專門的暗場(chǎng)聚光鏡。通常，CX43配有與暗場(chǎng)觀察兼容的聚光鏡，在安裝時(shí)，需要確保將暗場(chǎng)聚光鏡正確安裝到聚光鏡座上。聚光鏡通常具有不同的數(shù)值孔徑（NA），選擇合適的數(shù)值孔徑有助于提高圖像質(zhì)量。

• 聚光鏡數(shù)值孔徑選擇：在暗場(chǎng)模式下，一般選擇數(shù)值孔徑較大的聚光鏡（如NA 0.9或1.4），這有助于提高圖像的亮度和對(duì)比度。

3. 調(diào)整光源和亮度：

• 啟動(dòng)顯微鏡的光源，調(diào)節(jié)亮度至合適的水平。在暗場(chǎng)觀察中，光源的亮度需要調(diào)節(jié)得比較高，但又不能過(guò)于刺眼，以避免過(guò)度曝光或圖像質(zhì)量過(guò)差。

• 奧林巴斯CX43顯微鏡的LED光源亮度可以調(diào)節(jié)，根據(jù)樣品的不同，適當(dāng)增加或減少亮度。

三、調(diào)整光學(xué)系統(tǒng)

1. 調(diào)節(jié)光闌（Aperture Diaphragm）：

• 暗場(chǎng)顯微鏡利用光源的斜射光進(jìn)行成像，因此調(diào)節(jié)光闌至適當(dāng)?shù)拇笮∈欠浅Ｖ匾摹Ｕ{(diào)節(jié)光闌時(shí)，需要確保聚光鏡光斑的光線幾乎不直接照射到樣品上，只有散射光能通過(guò)樣品來(lái)形成圖像。

• 在顯微鏡的觀察過(guò)程中，通過(guò)逐步調(diào)節(jié)光闌，可以獲得較為理想的圖像效果。

2. 調(diào)整樣品位置和焦距：

• 用粗調(diào)焦旋鈕將樣品移到大致的焦距范圍內(nèi)。暗場(chǎng)觀察中，通常需要通過(guò)較細(xì)致的微調(diào)調(diào)節(jié)焦距，以確保樣品的細(xì)節(jié)清晰可見(jiàn)。

• 調(diào)節(jié)焦距時(shí)，確保圖像中心清晰，并且背景保持黑暗。

3. 使用適當(dāng)?shù)臑V光片（如有需要）：

• 如果需要提高對(duì)比度或進(jìn)行特定的樣品觀察，可以使用適合的濾光片。根據(jù)需要選擇合適的濾鏡，以增強(qiáng)或抑制特定波長(zhǎng)的光。

四、觀察樣品

1. 細(xì)致調(diào)整焦距：

• 通過(guò)微調(diào)焦距，使樣品的細(xì)節(jié)清晰顯示。如果樣品處于運(yùn)動(dòng)狀態(tài)，注意觀察過(guò)程中樣品的變動(dòng)情況。

2. 觀察圖像：

• 在暗場(chǎng)模式下，背景應(yīng)保持黑暗，而樣品的細(xì)微結(jié)構(gòu)則應(yīng)顯示為明亮的光點(diǎn)或細(xì)線條。這種效果是通過(guò)樣品的散射光所產(chǎn)生的。

• 在不同倍率下，觀察細(xì)胞、微生物或其他樣品的細(xì)節(jié)。暗場(chǎng)觀察使得透明、無(wú)色的結(jié)構(gòu)如細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞膜等能夠在黑色背景下清晰可見(jiàn)。

3. 調(diào)節(jié)對(duì)比度和亮度：

• 如果圖像亮度過(guò)高或?qū)Ρ榷炔粔?，可以適當(dāng)調(diào)整光源亮度或光闌大小。

• 如果圖像過(guò)于模糊或不清晰，可以進(jìn)一步微調(diào)焦距或物鏡位置。

五、圖像記錄與分析

1. 拍照與記錄：

• 如果需要記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可以使用顯微鏡的攝影系統(tǒng)，連接數(shù)字?jǐn)z像頭或相機(jī)進(jìn)行拍照。奧林巴斯CX43顯微鏡支持多種圖像采集設(shè)備，能夠幫助用戶保存樣品圖像。

• 在拍照時(shí)，確保樣品處于清晰焦距，背景依然保持黑暗，樣品細(xì)節(jié)明顯可見(jiàn)。

2. 數(shù)據(jù)分析：

• 通過(guò)顯微鏡采集的圖像，可以使用相關(guān)圖像處理軟件進(jìn)行進(jìn)一步分析，研究樣品的形態(tài)、分布等信息。

六、結(jié)束使用

1. 關(guān)閉光源與設(shè)備：

• 觀察完畢后，首先關(guān)閉顯微鏡的光源，然后關(guān)閉顯微鏡的電源。確保設(shè)備處于安全關(guān)閉狀態(tài)，以延長(zhǎng)設(shè)備壽命。

2. 清潔設(shè)備：

• 使用暗場(chǎng)觀察模式時(shí)，聚光鏡、物鏡等部分可能會(huì)有油漬或其他污染物，因此使用前后需要清潔設(shè)備。

• 清潔物鏡和聚光鏡時(shí)，使用專用的清潔紙或布，不要直接觸碰鏡頭表面。

小結(jié)

使用奧林巴斯顯微鏡CX43的暗場(chǎng)功能時(shí)，核心要點(diǎn)是選擇適當(dāng)?shù)奈镧R和聚光鏡，合理調(diào)節(jié)光源亮度、光闌以及焦距，以確保圖像的高對(duì)比度和清晰度。暗場(chǎng)功能特別適用于觀察透明或低對(duì)比度樣品，能夠幫助研究人員深入了解細(xì)胞結(jié)構(gòu)、微生物活動(dòng)等細(xì)節(jié)。通過(guò)適當(dāng)?shù)牟僮?，您可以獲得高質(zhì)量的暗場(chǎng)圖像，推動(dòng)相關(guān)科研工作的發(fā)展。