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大鼠白介素5(IL-5)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說(shuō)明書(shū)

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    2025年07月08日
關(guān)鍵詞
標(biāo)準(zhǔn)品,大鼠白介素5,IL-5 抗體,酶標(biāo)板,生物素化抗體
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本生(天津)健康科技有限公司
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資料簡(jiǎn)介

  以下是關(guān)于大鼠白介素5(IL-5)ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)使用說(shuō)明,綜合了多個(gè)來(lái)源的可靠信息:

  BS-2970 大鼠白介素5(IL-5)ELISA試劑盒

  一、實(shí)驗(yàn)原理

  采用雙抗體夾心法檢測(cè)樣本中IL-5含量。預(yù)包被抗大鼠IL-5抗體的微孔板捕獲樣本中的IL-5,再依次加入生物素化檢測(cè)抗體和HRP標(biāo)記的鏈霉親和素,形成復(fù)合物后通過(guò)TMB顯色反應(yīng)定量。顏色深淺與IL-5濃度成正比,通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算含量?。

  二、試劑盒組成

  核心組分?:預(yù)包被酶標(biāo)板、標(biāo)準(zhǔn)品(凍干粉,需復(fù)溶)、生物素化抗體、HRP酶結(jié)合物、TMB顯色液、終止液?

  輔助溶液?:20×濃縮洗滌液(需1:20稀釋)、樣品稀釋液、標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液?

  耗材?:封板膜、密封袋?

  三、樣本處理要求

  血清/血漿?:采集后室溫靜置10-20分鐘,2000-3000g離心20分鐘,避免溶血或脂血干擾?。

  細(xì)胞培養(yǎng)上清?:直接離心去除顆粒物,-20℃保存時(shí)避免反復(fù)凍融?。

  組織勻漿?:PBS沖洗后稱重勻漿,離心取上清,建議添加蛋白酶抑制劑?。

  四、標(biāo)準(zhǔn)操作步驟

  標(biāo)準(zhǔn)品稀釋?:復(fù)溶后梯度稀釋(如2000-31.2 pg/mL),建議設(shè)置8個(gè)濃度點(diǎn)?。

  加樣與孵育?:

  每孔加100μL樣本或標(biāo)準(zhǔn)品,37℃孵育90分鐘

  洗滌5次后加入生物素化抗體(100μL/孔),37℃孵育60分鐘?

  顯色與檢測(cè)?:

  加入TMB底物避光顯色15分鐘,終止反應(yīng)后30分鐘內(nèi)測(cè)定450nm吸光度?。

  五、關(guān)鍵注意事項(xiàng)

  質(zhì)量控制?:每板需設(shè)空白孔和標(biāo)準(zhǔn)曲線,OD值需扣除空白背景?。

  干擾避免?:避免使用NaN3防腐劑(抑制HRP活性),溶血/高脂樣本需預(yù)處理?。

  保存條件?:未使用的板條需密封干燥保存于2-8℃,標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶后需當(dāng)日使用?。

  六、性能參數(shù)

  檢測(cè)范圍?:典型為15.6-1000 pg/mL,靈敏度可達(dá)3.9 pg/mL?。

  精密度?:板內(nèi)/板間變異系數(shù)分別<10%

  注:以上資料僅供參考,不作為實(shí)驗(yàn)依據(jù),具體請(qǐng)咨詢技術(shù)老師或品牌供應(yīng)商。

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