小鼠骨髓瘤細(xì)胞系，Sp2/0細(xì)胞

小鼠骨髓瘤細(xì)胞系，Sp2/0細(xì)胞

培養(yǎng)細(xì)胞生長減慢
可能原因
（1）由于更換不同培養(yǎng)液或血清
（2）培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長必需成分如谷氨酰胺或生長因子耗盡或缺乏或已被破壞。
（3）培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染
（4）試劑保存不當(dāng)
（5）接種細(xì)胞起始濃度太低
（6）細(xì)胞已老化
（7）支原體污染
建議解決方法
（1）比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清支持細(xì)胞生長實(shí)驗(yàn)。讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液。
（2）換入新鮮配制培養(yǎng)液，或補(bǔ)加谷氨酰胺及生長因子。
（3）用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，丟棄培養(yǎng)物?；蛴每股爻?。
（4）血清需保存在-5℃ 到-20℃。培養(yǎng)液需在2－8℃避光保存。含血清*培養(yǎng)液在2-8℃保存，并在2 周內(nèi)用完。
（5）增加接種細(xì)胞起始濃度。
（6）換用新的保種細(xì)胞。
（7）分離培養(yǎng)物，檢測支原體。清潔支架和培養(yǎng)箱。如發(fā)現(xiàn)支原體污染，丟棄培養(yǎng)物。
培養(yǎng)細(xì)胞死亡
可能原因
（1）培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2
（2）培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大
（3）細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷
（4）培養(yǎng)液滲透壓不正確
（5）培養(yǎng)液種有毒代謝產(chǎn)物堆積
（6）更多原因參考問題4和問題7
建議解決方法
（1）檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2
（2）檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度
（3）取新的保存細(xì)胞種
（4）檢測培養(yǎng)液滲透壓。注意：大多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞能耐受滲透壓為260 – 350 mOsm/kg。加入額外試劑如HEPES或藥物都有可能影響培養(yǎng)液滲透壓。
（5）換入新鮮培養(yǎng)液
（6）更多解決方法參考問題4和問題7