產(chǎn)品描述
伴刀豆球蛋白A（ConA）磁珠是 粒徑為200 nm 的納米磁珠表面上共價結合了大量的伴刀豆球蛋白A（ConA）納米級磁珠提供的超大比表面積，具有更多的結合位點，磁珠使用量更少，非特異性吸附率低。用于分離細胞或從血清和細胞提取物中分離糖蛋白，并可以借助磁力架等磁分離設備非常便捷地應用于分離糖蛋白，CUT&RUN CUT&Tag 等相關實驗。
訂購信息
產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 |
伴刀豆蛋白A(ConA)磁珠 | AP62L222 | 1 mL |
運輸與保存
藍冰運輸。4℃保存，有效期12個月。注：避免凍融或離心磁珠。
技術參數(shù)
基質 | 硅基磁珠 |
配體 | 伴刀豆球蛋白A（ConA） |
粒徑 | 200nm |
磁珠濃度 | 10mg/mL |
結合能力 | ≥0.9mg 糖蛋白/mL磁珠 |
適用范圍 | 分離糖蛋白，CUT&RUN，CUT&Tag |
使用方法
自備試劑
緩沖液 | 配方 |
結合緩沖液 | 1×PBS, 1mM MgCl2, 1mM MnCl2, 1mM CaCl2 (pH7.4) |
洗滌緩沖液 | 1×PBS, 1mM MgCl2, 1mM MnCl2, 1mM CaCl2 (pH7.4), 0.1% Tween 20 |
洗脫緩沖液 | 5mM Tris(pH 8.0), 0.15M NaCl, 0.05% SDS，1M Glucose |
1.樣本處理
(1) 準備哺乳動物細胞(1.0×104~1.0×105個)，離心收集(4℃，600×g，3-5min)，小心吸棄上清；
(2) 加入 500 μL 結合緩沖液，充分混勻重懸細胞，離心收集(4℃，600×g，3-5min)，小心吸棄上清；
(3) 加入 200-500 μL結合緩沖液，同時加入蛋白酶抑制劑，充分混勻，重懸細胞。
2.磁珠預處理
(4) 用移液器輕柔吹打伴刀豆球蛋白A磁珠 ，使其充分混勻，取10 µL磁珠懸液（可酌情調(diào)整磁珠用量）置于新的 1.5 mL離心管中，接著在磁力架上靜置 1 min，待磁珠吸附到離心管側壁上后，吸棄上清；
(5) 加入 500μL 結合緩沖液 ，用移液器輕柔吹打重懸磁珠，接著在磁力架上靜置 1 min，待磁珠吸附到離心管側壁上后，吸棄上清；
(6) 重復上個步驟(5)一次，注：面對多個樣品時，可先將總共所需的磁珠預處理后再分裝到各個反應管中。
3.樣品的結合
(7) 在預處理后的磁珠中加入步驟3處理后的細胞樣本混合，置于旋轉混合儀上孵育（常溫30min），接著在磁力架上靜置 1min，待磁珠吸附到離心管側壁上后，小心吸棄上清，離心管中剩余的即為蛋白-磁珠復合物；
4.洗滌
(8) 在步驟(7)得到的蛋白-磁珠復合物中加入500 μL洗滌緩沖液，用移液器輕柔吹打磁珠，并置于旋轉混勻儀上孵育5min，接著在磁力架上靜置1min，待磁珠吸附到離心管側壁上后，吸棄上清。再重復此步驟兩次；
5.蛋白洗脫
(9) 在步驟(8)得到的蛋白-磁珠復合物中加入50~250 μL洗脫緩沖液，置于翻轉混合儀上孵育（常溫10-30 min），接著在磁力架上靜置 1 min，待磁珠吸附到離心管側壁上后，收集上清，即為目的蛋白。收集上清，即為目的蛋白。若洗脫效果不佳，可重復洗脫一次，或者增加孵育時間。
注意事項
1. 本產(chǎn)品僅限于科學實驗研究使用，不得用于臨床診斷、治療等領域。
2. 請勿高速離心、干燥或冷凍磁珠，這些操作會導致磁珠聚集而降低結合能力。
3. 避免使用含有 EDTA 或其它金屬螯合劑的試劑，否則會降低磁珠與蛋白的結合效率 。
4. 磁珠使用前應充分振蕩均勻。磁珠應保存在儲存溶液中，防止干燥。
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本產(chǎn)品僅限于科學實驗研究使用，不得用于臨床診斷、治療等領域。
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