Masson 三色染色試劑盒
Masson 三色染色是結(jié)締組織染色知更鳥(niǎo)經(jīng)典的一種方法,是顯示組織中纖維的主要方法之一,是膠原纖維染色而經(jīng)典的技術(shù)方法。該法染色原理與陰離子染料分子的大小和組織的滲透有關(guān):分子的大小由分子量來(lái)體現(xiàn),小分子量容易穿透結(jié)構(gòu)致密、滲透性低的組織;而大分子量則只能進(jìn)入結(jié)構(gòu)稀松的、滲透性高的組織。然而,淡綠或苯胺藍(lán)的分子量很大,因此Masson染色后肌纖維呈紅色,膠原纖維呈綠色或藍(lán)色,主要用于區(qū)分膠原纖維和肌纖維。
Masson試劑盒的特點(diǎn):◆染色穩(wěn)定;◆分化時(shí)間短,1-2分鐘;◆色彩清楚鮮艷;◆使用范圍廣,適宜于組織的石蠟切片、冰凍切片等染色;◆所染切片保存時(shí)間長(zhǎng)且不易褪色。
產(chǎn)品組成:
試劑(A-1) 蘇木素染色液 25ml
試劑(A-2) 三氯化鐵水溶液 25ml
試劑(B) 鹽酸乙醇分化液 50ml
試劑(C) 氨水水溶液 50ml
試劑(D) 麗春紅酸性品紅染色液 50ml
試劑(E) 乙酸水溶液 50ml
試劑(F) 磷鉬酸水溶液 50ml
試劑(G) 苯胺藍(lán)染色液 50ml
注:臨用時(shí)取A1、A2等量混合,成為試劑A,不可預(yù)先配制后放置,因染色液的色素根與鐵會(huì)化合。形成不容性沉淀,等量混合后,一般24小時(shí)后失去人力。
主要成分:
試劑(A):主要由蘇木素和三氯化鐵組成。
試劑(B):主要由乙醇和鹽酸水溶液組成。
試劑(C):主要由稀氨水水溶液組成。
試劑(D):主要由麗春紅和酸性品紅組成。
試劑(E):主要由乙酸水溶液組成。
試劑(F):主要由磷鉬酸水溶液組成。
試劑(G):主要由苯胺藍(lán)和弱酸組成。
操作步驟:
固定液應(yīng)選用甲醛鹽溶液、中性福爾馬林試劑(10%,NBF)進(jìn)行固定。
1、切片脫蠟至水。
2、試劑(A)染色5min-10min。
3、試劑(B)分化、水洗。
4、試劑(C)返藍(lán)、水洗。
5、蒸餾水或者去離子水洗1min。
6、試劑(D)染色5-10min。
7、試劑(E)洗1min。
8、試劑(F)洗1-2min
9、試劑(E)洗1min。
10、直接放入試劑(G)中染色1-2min。
11、試劑(E)洗1min。
12、95%乙醇快速脫水。
13、無(wú)水乙醇(1)5-10秒。
14、無(wú)水乙醇(2)5-10秒。
15、無(wú)水乙醇(3)5-10秒。
16、二jia苯(1)1-2分。
17、二jia苯(2)1-2分。
18、二jia苯(3)1-2分。
19、中性樹(shù)膠封固。
染色結(jié)果:細(xì)胞核呈藍(lán)色、胞漿、肌肉、紅細(xì)胞呈紅色,膠原纖維/蛋白呈藍(lán)色。
注意事項(xiàng):
1、切片脫蠟應(yīng)盡量干凈。
2、組織固定起著非常重要的作用,使用不同的固定液或縮短染色時(shí)間
3、經(jīng)典masson三色染色中,常要求使用試劑A染核,也可用Harris 蘇木精染核,但Harris 蘇木精染核后切片顏色不夠鮮艷,因?yàn)樯康闹饕谟趨^(qū)分膠原纖維和肌纖維,一般也可以省略該染色步驟。
4、試劑B的分化時(shí)間應(yīng)該依據(jù)切片厚薄、組織的類(lèi)別和新舊而定。
5、試劑E為0.2%乙酸水溶液,可使色彩更清楚鮮艷、如果使用量大可自行配制。
6、用試劑F分化要在鏡下控制,分化到膠原纖維呈淡紅色。纖維呈紅色即可。分化時(shí)間根據(jù)染色深淺而定。一般1-2min。
7、返藍(lán)液常使用氨水水溶液,亦可自行配制Scoot 促藍(lán)液或0.1-1%*水溶液。
8、戴一次性手套操作。
9、使用場(chǎng)所應(yīng)通風(fēng),并遠(yuǎn)離火源。
儲(chǔ)存條件:
2-25℃ 避光
科研領(lǐng)域Masson 三色染色試劑盒
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