CRISPR/Cas9制備基因敲除小鼠

CRISPR/Cas9技術(shù)制備基因敲入大、小鼠，實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)，行業(yè)，年末尊享*大優(yōu)惠！

    博舜聯(lián)合醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中心是一所由復(fù)旦大學(xué)，第二軍醫(yī)大學(xué)，華東師范大學(xué)，生命科學(xué)研究所，上海市調(diào)控生物學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，*上海藥物研究所等同道精英共同打造的一站式醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺(tái)。我們的顧問(wèn)團(tuán)隊(duì)來(lái)自清華大學(xué)、復(fù)旦大學(xué)，交通大學(xué)，浙江大學(xué)、中山大學(xué)、華東師范大學(xué)、*上海藥物研究所、德克薩斯農(nóng)工大學(xué)、哈佛醫(yī)學(xué)院、貝勒醫(yī)學(xué)院等高校和研究機(jī)構(gòu)的生命科學(xué)領(lǐng)域?qū)＜摇W(xué)者組成。
    
    博舜*從事基因敲除/敲入大、小鼠相關(guān)工作，團(tuán)隊(duì)成員在Nature Biotechnology、Nature Protocol、Nucleic Acids Research等雜志發(fā)表高水平文章。本公司可通過(guò)Cas9、TALEN技術(shù)進(jìn)行基因敲除大小鼠及條件敲除小鼠的制備工作，獲得Founder僅需2個(gè)月、獲得穩(wěn)定遺傳的F1代僅zui快僅需4個(gè)月。如有需要咨詢、交流。：
 

一、技術(shù)原理

       Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats（CRISPR）是細(xì)菌和古細(xì)菌為應(yīng)對(duì)病毒和質(zhì)粒不斷攻擊而演化來(lái)的獲得性免疫防御機(jī)制，其中II型CRISPR/Cas免疫系統(tǒng)依賴Cas9內(nèi)切酶家族靶向和剪切外源DNA。在這一系統(tǒng)中，crRNA（CRISPR-derived RNA）通過(guò)堿基配對(duì)與tracrRNA（trans-activating RNA）結(jié)合形成雙鏈RNA，此tracrRNA/crRNA二元復(fù)合體指導(dǎo)Cas9蛋白在crRNA引導(dǎo)序列靶定位點(diǎn)剪切雙鏈DNA，其中Cas9的HNH核酸酶結(jié)構(gòu)域剪切互補(bǔ)鏈，其RuvC-like結(jié)構(gòu)域剪切非互補(bǔ)鏈。具體如下圖所示：

二、CRISPR/Cas9技術(shù)特點(diǎn)

1、靶向精確性更高；RNA靶向序列和基因組序列必須*匹配，Cas9才會(huì)對(duì)DNA進(jìn)行剪切。

2、可實(shí)現(xiàn)對(duì)多個(gè)靶基因位點(diǎn)以及多個(gè)基因同時(shí)進(jìn)行敲除。

3、試驗(yàn)周期短，獲得F0代僅需2個(gè)月。

4、無(wú)物種和品系限制，可對(duì)大鼠和小鼠進(jìn)行敲除、敲除、點(diǎn)突變等編輯。 
 

三、服務(wù)流程及周期

1、靶向目標(biāo)序列的Guide RNA設(shè)計(jì)、顯微注射、F0代鑒定；

2、提供3只以上F1代小鼠

3、獲得Founder僅需2個(gè)月，4個(gè)月即可獲得F1代

獲得F1代雜合子小鼠后，完成基因敲除及表達(dá)檢測(cè)，提供不少于3只F1代雜合子小鼠，通知委托方領(lǐng)取小鼠。
部分案例展示
 

           
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