ACK紅細(xì)胞裂解液（ACK Lysis Buffer）說明書

ACK紅細(xì)胞裂解液(ACK Lysis Buffer)說明書詳細(xì)介紹：

中文名：ACK紅細(xì)胞裂解液(ACK Lysis Buffer)

供應(yīng)商：上海遠(yuǎn)慕

規(guī)格：100ml

分類：細(xì)胞組分分離

保存：4℃,12個月

用途：去除細(xì)胞懸液中的紅細(xì)胞,屬于溶解紅細(xì)胞方法的一種。

說明：無菌溶液。注意無菌操作,經(jīng)過濾除菌處理。

適用范圍：限于科研，實(shí)驗(yàn) ，不作臨床

ACK紅細(xì)胞裂解液(ACK Lysis Buffer)使用說明：

1.取新鮮抗凝血，400～500g離心5min，離心棄上清。   

2.裂解: 加入6～10倍細(xì)胞沉淀體積的ACK Lysis Buffer，輕柔吹打混勻，裂解1～5min。本操作步驟在4℃條件下操作更佳，亦可在室溫下操作。（特別提醒：對于鼠的血液，裂解1～2min已經(jīng)足夠，對于人的外周血，宜延長裂解時間至4～5min，并且裂解過程中輕輕搖動以促進(jìn)紅細(xì)胞裂解）   

3.離心: 4℃，400～500g離心5min，棄紅色上清。如無低溫離心機(jī)本步驟亦可在室溫下操作。   

4.如果發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞裂解不*，可以重復(fù)上述步驟2和步驟3一次。 

5.洗滌: 根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)要求加入適量PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液，輕柔混勻重懸沉淀4℃，400～500g離心2～3min，棄上清，離心步驟亦可在室溫下操作。所加入的PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液的量一般應(yīng)大于細(xì)胞沉淀體積的5倍以上。

6.根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要用適當(dāng)溶液重懸細(xì)胞沉淀，進(jìn)行計數(shù)、培養(yǎng)等后續(xù)實(shí)驗(yàn)。 

注意： 對于微量或少量的血液樣本，可以不用第1步操作，加入10倍血液體積的ACK Lysis Buffer進(jìn)行第2步操作，并在4℃或室溫裂解4～15min。對于鼠的血液，裂解4～5min已經(jīng)足夠；對于人的外周血，宜延長裂解時間至10min，但通常不宜超過15min，并且裂解過程中宜適當(dāng)搖動以促進(jìn)紅細(xì)胞裂解。

ACK紅細(xì)胞裂解液(ACK Lysis Buffer)說明書作用原理：
細(xì)胞裂解液一般都用的是含酶的,在血紅細(xì)胞表面上有紅細(xì)胞專屬的表面抗原,當(dāng)裂解液中含可以攻擊特定紅細(xì)胞表面抗原的酶的時候 就只會造成紅細(xì)胞的變形,生物通道擴(kuò)大,膨脹,裂解,或者引起紅細(xì)胞的變性.而不會攻擊其他細(xì)胞.另外紅細(xì)胞有自己的電負(fù)性,滲透脆性(通常是一些非酶細(xì)胞裂解液的突破點(diǎn)) ,懸浮穩(wěn)定性,這都是區(qū)別于其他種類細(xì)胞的區(qū)別點(diǎn).紅細(xì)胞裂解液就是利用這些特性裂解紅細(xì)胞的.另外紅細(xì)胞裂解液不能達(dá)到100% 準(zhǔn)確的裂解紅細(xì)胞,總會或多或少導(dǎo)致其他種類細(xì)胞的裂解.

ACK紅細(xì)胞裂解液(ACK Lysis Buffer)說明書注意事項： 

1.制備細(xì)胞懸液是應(yīng)根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)需要，不一定要制備成單細(xì)胞懸液。 

2.后續(xù)試驗(yàn)如果是用于細(xì)胞培養(yǎng)，操作過程中應(yīng)注意無菌操作，盡量在超凈工作臺內(nèi)操作。

3.離心步驟盡量在4℃離心機(jī)上操作。 

4.對于常規(guī)步驟與快速步驟的區(qū)別在于：常規(guī)步驟多了一步洗滌過程的離心，可以節(jié)省洗滌液的用量，并且洗滌效果也更好，不需要大體積的離心管；快速步驟少了一次離心過程，洗滌效果略差一些，同時需要大體積的離心管。 

5.離心洗滌后，通常極微量的紅細(xì)胞不會影響后續(xù)的檢測。   

6.經(jīng)過ACK Lysis Buffer處理后的樣品后續(xù)用于總RNA的提取，在處理細(xì)胞時不必使用DEPC處理的溶液，即無需在該操作中特意去除RNase。

7.為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

ACK紅細(xì)胞裂解液(ACK Lysis Buffer)說明：

對于裂解、去除有細(xì)胞核紅細(xì)胞，例如鳥或禽類的紅細(xì)胞，效果不佳，裂解類似細(xì)胞時，不建議采用。本裂解液經(jīng)過濾除菌，經(jīng)過ACK Lysis Buffer處理過的血液或組織細(xì)胞樣品可以用于后續(xù)的細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞融合以及核酸或蛋白的提取及各種常規(guī)的分析和檢測。

標(biāo)簽：ACK紅細(xì)胞裂解液(ACK Lysis Buffer)，ACK紅細(xì)胞裂解液，紅細(xì)胞裂解液