HEEC 人正常食管上皮細(xì)胞|HEEC細(xì)胞有鑒定

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細(xì)胞名稱：HEEC 人正常食管上皮細(xì)胞|HEEC細(xì)胞有鑒定

一、細(xì)胞培養(yǎng) 

(一)原理 細(xì)胞培養(yǎng)(Cell culture)是模擬機(jī)體內(nèi)生理?xiàng)l件，將細(xì)胞從機(jī)體中取出，在人工條件下使其生存、生長、繁殖和傳代，進(jìn)行細(xì)胞生命過程、細(xì)胞癌變、細(xì)胞工程等問題的研究。近年來，廣泛地應(yīng)用于分子生物學(xué)、遺傳學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、細(xì)胞工程等領(lǐng)域，發(fā)展成一種重要生物技術(shù)，并取得顯著成就。由體內(nèi)直接取出組織或細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)叫原代培養(yǎng)。原代培養(yǎng)細(xì)胞離體時間短，性狀與體內(nèi)相似，適用于研究。一般說來，幼稚狀態(tài)的組織和細(xì)胞，如：動物的胚胎、幼仔的臟器等更容易進(jìn)行原代培養(yǎng)。 

 (二)操作 1．取材 用頸椎脫位法使乳兔迅速死亡。然后，把整個動物浸入盛有75％乙醇的燒杯中數(shù)秒鐘消毒，取出后放在大平皿中攜入超凈臺。用消過毒的剪刀剪開用碘酒和乙醇再次消毒后的皮膚，剖腹取出肝臟或腎臟。置于無菌平皿中。 2．切割 用滅菌的PBS液將取出的臟器清洗三次，然后用眼科手術(shù)剪刀仔細(xì)將組織反復(fù)剪碎，直到成1mm3左右的小塊，再用PBS清洗，洗到組織塊發(fā)白為止。移入無菌離心管中，靜置數(shù)分鐘，使組織塊自然沉淀到管底，棄去上清。 3．消化、接種培養(yǎng) 吸取0.25％胰蛋白酶一0.02％EDTA混合消化液1ml，加入離心管中，與組織塊混勻后，加上管口塞子，37℃水浴中消化8～10分鐘，每隔幾分鐘搖動一下試管，使組織與消化液充分接觸，靜止，吸去上清，向離心管中加入5～10ml含5％小牛血清的MEM培養(yǎng)基，用吸管吹打混勻，移入二個培養(yǎng)瓶中，置于二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。  

(三)結(jié)果 細(xì)胞接種后一般幾小時內(nèi)就能貼壁，并開始生長，如接種的細(xì)胞密度適宜，5天到一周即可形成單層。

HEEC 人正常食管上皮細(xì)胞|HEEC細(xì)胞有鑒定

2BS       人胚肺二倍體細(xì)胞

293（HEK-293；HEK293）人胚腎細(xì)胞  

293 Ad5人原胚腎轉(zhuǎn)化細(xì)胞

2V6.11人胚腎細(xì)胞

BEAS-2B人正常肺上皮細(xì)胞           

Caco-2人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞  

Caov-3人乳頭狀卵巢腺癌細(xì)胞

C918人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞      

CNLMG-B5537SKIN      人類成纖維細(xì)胞

CNLMG-B5538LC   人永生化淋巴細(xì)胞

CNLMG-B5538SKIN      人類成纖維細(xì)胞

CCC-ESF-1人胚皮膚成纖維細(xì)胞     

CCC-HB-2人胚膀胱組織來源細(xì)胞   

CCC-HBE-2人胚氣管組織來源細(xì)胞

做細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的同學(xué)看過來。原裝ATCC細(xì)胞現(xiàn)貨來啦。 

選擇上海青旗生物細(xì)胞有3個理由：

1、細(xì)胞狀態(tài)好，形態(tài)佳，易成活，是市面上比較好養(yǎng)的細(xì)胞之一;

2、物流迅速，復(fù)蘇好后發(fā)貨，次日就能到;

3、使用我司推薦的進(jìn)口品牌血清進(jìn)行培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)，效果更佳。

專業(yè)技術(shù)人員李工收藏的細(xì)胞培養(yǎng)小技巧:

1. 買細(xì)胞要去靠譜的地方買，比如 ATCC 或者青旗生物。一般上面會有針對細(xì)胞的介紹，這樣培養(yǎng)之前可以了解細(xì)胞正常生長的狀態(tài)圖、傳代、培養(yǎng)基的類型等。

2. 不管是買的細(xì)胞，還是別人惠贈的細(xì)胞，剛拿到手趕緊的做兩件事：檢測是否有支原體污染;迅速擴(kuò)增凍存，凍存細(xì)胞復(fù)蘇后第二天*更換一次培養(yǎng)基。

3. 發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有污染迅速處理掉，特別是當(dāng)你養(yǎng)了很多種細(xì)胞時。細(xì)菌污染、真菌污染很容易發(fā)現(xiàn)，支原體污染的話，細(xì)胞會長的慢，可以買個支原體檢測的試劑盒定期檢測一下。

4. 不同細(xì)胞生長周期不同。有的生長很快，比如說 MDA-MB-231，傳代的時候取離心懸液的十分之一就已經(jīng)足夠了。有的又是特別慢，比如 BT474，傳代是一分二，復(fù)蘇起始的時候兩周多才能長滿。這就需要要在培養(yǎng)細(xì)胞的過程中多多摸索。

5. 對于嬌弱的細(xì)胞，就得細(xì)心呵護(hù)。胰酶消化不能過久，吹得時候要輕柔，離心時候也要注意轉(zhuǎn)速和時間。每天都要去看一下細(xì)胞，肉眼觀察培養(yǎng)基狀況、顯微鏡下觀察細(xì)胞生長狀況。記住，是每天。

細(xì)胞培養(yǎng)常見問題及解決方法

 ★由于細(xì)胞庫現(xiàn)有細(xì)胞類目多，為了不出現(xiàn)混亂錯誤，需要了解相關(guān)細(xì)胞價格及詳細(xì)資料直接call，對您造成的不便還請見諒！
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最后，通過低溫保藏儲備一些細(xì)胞，以防支原體大面積來襲。如果支原體有抬頭的跡象，或常規(guī)檢測呈陽性結(jié)果，那么較可靠的補(bǔ)救措施是扔掉所有培養(yǎng)物，清潔培養(yǎng)箱和超凈臺，一切從頭開始。當(dāng)然，你得確保儲備的細(xì)胞是不含支原體的。