FC-404-2003 illumina NextSeq 500/550 v2測序試劑盒

產(chǎn)品名稱：NextSeq 500/550 Mid Output v2 kit (300 cycles)

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產(chǎn)品貨號(hào)：FC-404-2003

適用系統(tǒng)：illumina NextSeq 500, NextSeq 550測序儀

產(chǎn)品介紹：

在 NextSeq 500/550上執(zhí)行測序運(yùn)行需要使用一次性 NextSeq 500/550試劑盒。每個(gè)試劑盒包含一個(gè)流動(dòng)槽和一次測序運(yùn)行所需的試劑。流動(dòng)槽、試劑夾盒和緩沖液夾盒均使用射頻識(shí)別（radio-frequency identification，簡稱RFID）進(jìn)行精確的耗材跟蹤并確保兼容性。 

NextSeq 500/550 v2測序試劑盒將高通量測序系統(tǒng)的功能整合到臺(tái)式計(jì)算機(jī)中，不僅改善了數(shù)據(jù)質(zhì)量，而且使無錯(cuò)誤片段產(chǎn)率達(dá)到zui高水平。此試劑盒具有下列優(yōu)點(diǎn)：出色的堿基檢出，提升的信噪比

提供多種測序輸出和片段長度選擇方案

試劑夾盒配置簡化，工作流程和夾盒上樣改善

提供直觀標(biāo)記和RFID編碼試劑

采用的邊合成邊測序(SBS)和橋式擴(kuò)增簇生成技術(shù)，優(yōu)化化學(xué)過程

此試劑盒不僅提供強(qiáng)大的測序化學(xué)過程，而且將手動(dòng)操作時(shí)間壓縮至短短10分鐘。直觀標(biāo)記和RFID編碼試劑確保與用戶自定義的運(yùn)行配置兼容。

（NextSeq 500/550 v2套件已于2018年12月31日停產(chǎn); 出貨量持續(xù)到2019年2月28日.TG版本不受影響。NextSeq 500/550 v2.5套件是替代產(chǎn)品，與v2套件相比，具有更高的穩(wěn)定性和堅(jiān)固性。）

產(chǎn)品名稱：illumina NextSeq 500/550 v2測序試劑盒(300 cycles)        產(chǎn)品貨號(hào)：FC-404-2003

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配套產(chǎn)品或相關(guān)產(chǎn)品：

品牌                產(chǎn)品貨號(hào)           產(chǎn)品名稱

illumina品牌        FC-404-2001        NextSeq 500/550 Mid Output v2 kit (150 cycles)

illumina品牌        FC-404-2002        NextSeq 500/550 High Output v2 kit (150 cycles)

illumina品牌        FC-404-2003        NextSeq 500/550 Mid Output v2 kit (300 cycles)

illumina品牌        FC-404-2004        NextSeq 500/550 High Output v2 kit (300 cycles)

illumina品牌        FC-404-2005        NextSeq 500/550 High Output v2 kit (75 cycles)

illumina品牌        TG-160-2001        TG NextSeq® 500/550 Mid Output Kit v2 (150 cycles)

illumina品牌        TG-160-2002        TG NextSeq® 500/550 High Output Kit v2 (150 cycles)

illumina品牌        TG-160-2003        TG NextSeq® 500/550 Mid Output Kit v2 (300 cycles)

illumina品牌        TG-160-2004        TG NextSeq® 500/550 High Output Kit v2 (300 cycles)

illumina品牌        TG-160-2005        TG NextSeq® 500/550 High Output Kit v2 (75 cycles)

illumina品牌        20030228           TG NextSeq™ 500/550 High Output Kit v2.1 (150 Cycles)

illumina品牌        20030229           TG NextSeq™ 500/550 High Output Kit v2.1 (300 Cycles)

illumina品牌        20030410           TG NextSeq™ 500/550 High Output Kit v2.1 (75 Cycles)

illumina品牌        20024904           NextSeq 500/550 Mid Output Kit v2.5 (150 Cycles)

illumina品牌        20024905           NextSeq 500/550 Mid Output Kit v2.5 (300 Cycles)

illumina品牌        20024906           NextSeq 500/550 High Output Kit v2.5 (75 Cycles)

illumina品牌        20024907           NextSeq 500/550 High Output Kit v2.5 (150 Cycles)

illumina品牌        20024908           NextSeq 500/550 High Output Kit v2.5 (300 Cycles)

illumina品牌        20024909           TG NextSeq 500/550 Mid Output Kit v2.5 (150 Cycles)

illumina品牌        20024910           TG NextSeq 500/550 Mid Output Kit v2.5 (300 Cycles)

illumina品牌        20024911           TG NextSeq 500/550 High Output Kit v2.5 (75 Cycles)

illumina品牌        20024912           TG NextSeq 500/550 High Output Kit v2.5 (150 Cycles)

illumina品牌        20024913           TG NextSeq 500/550 High Output Kit v2.5 (300 Cycles)

產(chǎn)品名稱：NextSeq 500/550 Mid Output v2 kit (300 cycles)

產(chǎn)品貨號(hào)：FC-404-2003

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Illumina二代測序技術(shù)，邊合成邊測序（SBS），是廣泛采用的新一代測序（NGS）技術(shù)，負(fù)責(zé)產(chǎn)生世界上90％以上的測序數(shù)據(jù)。

Illumina的二代測序技術(shù)稱為邊合成邊測序(Sequencing-by-Synthesis,簡稱SBS)。SBS主要包括堿基延伸、熒光激發(fā)及信號(hào)收集、剪切等3個(gè)步驟。這3個(gè)步驟可以重復(fù)，循環(huán)進(jìn)行。每循環(huán)一次測定一個(gè)堿基。想測定多少個(gè)堿基（即讀長），就循環(huán)多少次。測序循環(huán)次數(shù)可以在軟件里設(shè)定。到底測序多長合適，要根據(jù)項(xiàng)目性質(zhì)和需求來決定。大多數(shù)情況下，SR實(shí)驗(yàn)（單端測序）測定1x50個(gè)堿基，PE實(shí)驗(yàn)（雙端測序）測定2x150個(gè)堿基。

1 堿基延伸

Illumina測序試劑里所使用的dNTP特色，它們同時(shí)具有兩個(gè)修飾基團(tuán)：一個(gè)熒光基團(tuán)，一個(gè)可逆終止基團(tuán)。A、G、C、T 4種堿基分別標(biāo)記4種不同的熒光基團(tuán)，它們?cè)诓煌ㄩL的激光激發(fā)下，能夠發(fā)射不同波長（即顏色）的熒光。熒光顏色與堿基種類一一對(duì)應(yīng)，因此根據(jù)激發(fā)光的波長可以識(shí)別堿基。4種堿基的終止基團(tuán)是一樣的。由于終止基團(tuán)的存在，所有dNTP每次都只能延伸1個(gè)堿基，無論給予多長的反應(yīng)時(shí)間。又由于該終止基團(tuán)是可逆的，在熒光信號(hào)收集完畢之后，可以用剪切劑切除該終止基團(tuán)，使堿基恢復(fù)自然的可延伸狀態(tài)，這時(shí)即可繼續(xù)進(jìn)行下一輪循環(huán)，再測定一個(gè)堿基。

可逆終止基團(tuán)技術(shù)是Illumina二代測序的一大特色。它與橋式PCR技術(shù)一起，構(gòu)成了Illumina二代測序的兩大支柱，為穩(wěn)定獲得高質(zhì)量的測序數(shù)據(jù)打下了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。

2 信號(hào)采集

HiSeq系列測序儀具有紅綠兩根激光管，兩個(gè)濾色片。它們兩兩組合，可以形成4種不同的激發(fā)波長，正好分別用于激發(fā)A、G、C、T 4種堿基。

Cluster上所標(biāo)記的熒光基團(tuán)在激光激發(fā)下產(chǎn)生的信號(hào)，可以用相機(jī)拍攝或者掃描的方式收集信號(hào)。掃描技術(shù)速度比較快，被X10系列采用。由于FC面積比較大，而且上表面和下表面要分別拍照，所以拍照過程相當(dāng)耗時(shí)。對(duì)于經(jīng)典的HiSeq 2000來說，一次測序循環(huán)所產(chǎn)生的熒光信號(hào)，需要大約40分鐘的時(shí)間才能拍照收集完畢，時(shí)間比測序反應(yīng)本身還要長。

3 剪切

熒光信號(hào)收集完畢后，關(guān)閉激光，用剪切劑去除測序引物的延伸產(chǎn)物上的堿基所標(biāo)記的熒光基團(tuán)和終止基團(tuán)。兩個(gè)修飾基團(tuán)均被切除，一方面消去干擾熒光，一方面使鏈末端的堿基回復(fù)到自然的可延伸狀態(tài)，為下一輪測序做好準(zhǔn)備。

再重復(fù)合成、激發(fā)、收集等步驟，即可進(jìn)行第二個(gè)堿基的測序。

測序循環(huán)可以重復(fù)多次。理論上可以一直重復(fù)，直到信噪比降低得無法有效識(shí)別堿基信號(hào)為止。由于熒光基團(tuán)的發(fā)光效率持續(xù)不斷在衰減，Taq酶的活性也在持續(xù)不斷地衰減，所以實(shí)際上測序循環(huán)次數(shù)是有限的，大重復(fù)次數(shù)與sbs試劑的配方有關(guān)。測序的循環(huán)次數(shù)可以在軟件設(shè)置過程中人為，這個(gè)重復(fù)次數(shù)就是每個(gè)測序片段的讀長。目前，Illumina平臺(tái)的讀長有2x100 bp，2x125 bp，2x150 bp，2x300 bp等多種，其中2x150 bp用得較廣泛。

單端測序：單端測序(Single-read)首先將DNA樣本進(jìn)行片段化處理形成200-500bp的片段，引物序列連接到DNA片段的一端，然后末端加上接頭，將片段固定在flow cell上生成DNA簇，上機(jī)測序單端讀取序列。

雙端測序：雙端測序(Paired-end)方法是指在構(gòu)建待測DNA文庫時(shí)在兩端的接頭上都加上測序引物結(jié)合位點(diǎn)，在*輪測序完成后，去除*輪測序的模板鏈，用對(duì)讀測序模塊(Paired-End Module)引導(dǎo)互補(bǔ)鏈在原位置再生和擴(kuò)增，以達(dá)到第二輪測序所用的模板量，進(jìn)行第二輪互補(bǔ)鏈的合成測序。

cDNA文庫：以mRNA為模板，經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶催化，在體外反轉(zhuǎn)錄成cDNA，與適當(dāng)?shù)妮d體(常用噬菌體或質(zhì)粒載體)連接后轉(zhuǎn)化受體菌，則每個(gè)細(xì)菌含有一段cDNA，并能繁殖擴(kuò)增，這樣包含著細(xì)胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合稱為該組織細(xì)胞的cDNA文庫。cDNA文庫特異地反映某種組織或細(xì)胞中，在特定發(fā)育階段表達(dá)的蛋白質(zhì)的編碼基因，因此cDNA文庫具有組織或細(xì)胞特異性。

cDNA文庫是以特定的組織或細(xì)胞mRNA為模板，逆轉(zhuǎn)錄形成的互補(bǔ)DNA(cDNA)與適當(dāng)?shù)妮d體(常用噬菌體或質(zhì)粒載體)連接后轉(zhuǎn)化受體菌形成重組DNA克隆群，這樣包含著細(xì)胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合稱為該組織或細(xì)胞的cDNA文庫。cDNA文庫特異地反映某種組織或細(xì)胞中，在特定發(fā)育階段表達(dá)的蛋白質(zhì)的編碼基因，因此cDNA文庫具有組織或細(xì)胞特異性

cDNA文庫顯然比基因組DNA文庫小得多，能夠比較容易從中篩選克隆得到細(xì)胞特異表達(dá)的基因。但對(duì)真核細(xì)胞來說，從基因組DNA文庫獲得的基因與從cDNA文庫獲得的不同，基因組DNA文庫所含的是帶有內(nèi)含子和外顯子的基因組基因，而從cDNA文庫中獲得的是已經(jīng)過剪接、去除了內(nèi)含子的cDNA。

真核生物基因組DNA十分龐大,其復(fù)雜程度是蛋白質(zhì)和mRNA的100倍左右,而且含有大量的重復(fù)序列. 采用電泳分離和雜交的方法,都難以直接分離到目的基因.這是從染色體DNA為出發(fā)材料直接克隆目的基因的一個(gè)主要困難。

高等生物一般具有10^5種左右不同的基因,但在一定時(shí)間階段的單個(gè)細(xì)胞或個(gè)體中,都僅有15%左右的基因得以表達(dá),產(chǎn)生約15000種不同的mRNA分子.可見,由mRNA出發(fā)的cDNA克隆,其復(fù)雜程度要比直接從基因組克隆簡單得多。

cDNA文庫在研究具體某類特定細(xì)胞中基因組的表達(dá)狀態(tài)及表達(dá)基因的功能鑒定方便具有特殊的優(yōu)勢，從而使它在個(gè)體發(fā)育、細(xì)胞分化、細(xì)胞周期調(diào)控、細(xì)胞衰老和死亡調(diào)控等生命現(xiàn)象的研究中具有更為廣泛的應(yīng)用價(jià)值，是研究工作中較常使用到的基因文庫。

產(chǎn)品名稱：NextSeq 500/550 Mid Output v2 kit (300 cycles)

產(chǎn)品貨號(hào)：FC-404-2003

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illumina品牌        20020013        Autoloader Channel Partner Parts Only Support Plan-EMEA/LATAM

illumina品牌        20020014        Autoloader 2 Channel Partner Parts Only Support Plan-EMEA/LATAM

illumina品牌        20020015        cBot® Channel Partner - Parts Only Support Plan (EMEA/LATAM)

illumina品牌        20020016        cBot2 Channel Partner - Parts Only Support Plan (EMEA/LATAM)

illumina品牌        20020019        HiSeq 1000 Channel Partner - Parts Only Support Plan (EMEA/LATAM)

illumina品牌        20020020        HiSeq 1500 Channel Partner - Parts Only Support Plan (EMEA/LATAM)

illumina品牌        20020021        HiSeq 2000 Channel Partner - Parts Only Support Plan (EMEA/LATAM)

illumina品牌        20020022        HiSeq 2500 Channel Partner - Parts Only Support Plan (EMEA/LATAM)

illumina品牌        20020023        HiSeq 3000 Channel Partner - Parts Only Support Plan (EMEA/LATAM)

illumina品牌        20020024        HiSeq 4000 Channel Partner - Parts Only Support Plan (EMEA/LATAM)

illumina品牌        20020025        HiSeq X Channel Partner - Parts Only Support Plan (EMEA/LATAM)

illumina品牌        20020027        iScan Channel Partner Parts Only Support Plan (EMEA/LATAM)

illumina品牌        20020028        MiniSeq Channel Partners Parts Only Support Plan- EMEA/LATAM

illumina品牌        20020029        MiSeq Channel Partner - Parts Only Support Plan (EMEA/LATAM)

illumina品牌        20020030        MiSeq FGx Channel Partner - Parts Only Support Plan (EMEA/LATAM)

illumina品牌        20020031        MiSeqDx Channel Partner - Parts Only Support Plan (EMEA/LATAM)

illumina品牌        20020032        NextSeq 500 Channel Partner - Parts Only Support Plan (EMEA/LATAM)

illumina品牌        20020033        NextSeq 550 Channel Partner - Parts Only Support Plan (EMEA/LATAM)

illumina品牌        20020034        NovaSeq 6000 Channel Partner - Parts Only Support Plan (EMEA/LATAM)

illumina品牌        20020036        Autoloader Channel Partner Parts Only Support Plan - APAC

illumina品牌        20020037        Autoloader 2 Channel Partner Parts Only Support Plan - APAC

illumina品牌        20020038        cBot® Channel Partner Parts Only Support Plan - APAC

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illumina品牌        20020042        HiSeq 1000 Channel Partner Parts Only Support Plan - APAC

illumina品牌        20020043        HiSeq 1500 Channel Partner Parts Only Support Plan - APAC

illumina品牌        20020044        HiSeq 2000 Channel Partner Parts Only Support Plan - APAC

illumina品牌        20020045        HiSeq 2500 Channel Partner Parts Only Support Plan - APAC

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產(chǎn)品名稱：illumina NextSeq 500/550 v2測序試劑盒(300 cycles)        產(chǎn)品貨號(hào)：FC-404-2003

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