HaloTag親和試劑-融合蛋白

HaloTag親和試劑-融合蛋白

HaloTag親和試劑-融合蛋白

HaloTag®*是來自紅球紅球菌的細菌鹵代烷脫鹵酶的改良變體  。它被設(shè)計成與基于反應(yīng)性氯烷的配體形成共價鍵。當(dāng)與目標(biāo)蛋白質(zhì)靶標(biāo)融合時，該專門的反應(yīng)位點可進行多種生物化學(xué)和細胞實驗，例如亞細胞定位，酶促測定等。

生化分析的一個重要方面是直接從表達該構(gòu)建體的細胞中獲得HaloTag蛋白。Halo-Trap是一種高質(zhì)量的HaloTag結(jié)合蛋白，與瓊脂糖珠偶聯(lián)，用于HaloTag融合蛋白及其相互作用伙伴的超高親和力純化。使用Halo-Trap，即使共價結(jié)合到HaloTag配體（例如熒光染料）上，也可以免疫沉淀HaloTag-fusion蛋白。HaloTag融合蛋白甚至無需蛋白酶即可洗脫！這種多功能的親和試劑與免疫沉淀，Co-IP，質(zhì)譜和酶活性測量兼容。

Halo-Trap可以進行細胞成像和生物化學(xué)純化。
輸入（I），未結(jié)合（FT）和結(jié)合（B）的級分通過SDS-PAGE分離，然后進行考馬斯亮藍染色，蛋白質(zhì)印跡和熒光掃描。由于Halo-Trap在其催化中心外的表位上與HaloTag結(jié)合，因此以類似的效率捕獲了未結(jié)合的HaloTag融合蛋白（左）和與諸如HaloTag TMR之類的配體共價結(jié)合的HaloTag融合物。這種從細胞中進行的超高效，一步純化，使成像和純化成為可能?，F(xiàn)在，也可以純化用HaloTag配體處理的細胞進行成像，以進行生化研究-使HaloTag系統(tǒng)像GFP-Trap系統(tǒng)一樣具有廣泛的表達能力。