蛋白相互作用分析

蛋白相互作用分析

蛋白質(zhì)是細(xì)胞活性和功能的執(zhí)行者，且蛋白質(zhì)是依靠蛋白間相互作用執(zhí)行功能的，因而研究蛋白的相互作用對(duì)于研究細(xì)胞活

性和功能、解釋生命過(guò)程和現(xiàn)象具有重要意義。

實(shí)驗(yàn)意義

1.蛋白相互作用分析是研究蛋白功能的重要工具。

2.蛋白相互作用出現(xiàn)異常會(huì)影響正常細(xì)胞的活性和功能，導(dǎo)致許多疾病的發(fā)生，比如神經(jīng)退行性疾病和惡性腫瘤等，這對(duì)相

關(guān)疾病的病理診斷以及臨床治療研究具有重要意義。

實(shí)驗(yàn)原理

1. GST蛋白的表達(dá):選擇合適的蛋白表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)帶GST標(biāo)簽的融合蛋白;

2.制備誘餌蛋白-GST融合蛋白裂解液:

3.通過(guò)谷胱甘肽親和樹(shù)脂柱富集誘餌蛋白-GST融合蛋白，洗脫未結(jié)合的雜蛋白;

4.目標(biāo)蛋白也可以通過(guò)蛋白表達(dá)系統(tǒng)進(jìn)行表達(dá)純化;

5.將含有目標(biāo)蛋白的混合物加入柱中與親和固定在柱上的誘餌蛋白相互作用從而被吸附，洗脫未結(jié)合的雜蛋白;

6.用谷胱甘肽洗脫緩沖液將蛋白相互作用復(fù)合物洗脫下來(lái);

7.通過(guò)SDS-PAGE和Western Blo或質(zhì)譜進(jìn)行檢測(cè)。

結(jié)果展示

實(shí)驗(yàn)周期及交付標(biāo)準(zhǔn)

1.實(shí)驗(yàn)周期: 3-5周

2.交付標(biāo)準(zhǔn): WB檢測(cè)結(jié)果、載體設(shè)計(jì)報(bào)告、實(shí)驗(yàn)報(bào)告(試劑、 耗材、實(shí)驗(yàn)步驟)、原始數(shù)據(jù)等

需確認(rèn)信息

1.目的蛋白及信息

2.樣本種屬及類(lèi)型

3.是否提供一抗.