XSL0048 細(xì)胞Hochest凋亡染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)

細(xì)胞Hochest凋亡染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)

【星森林生物】實(shí)驗(yàn)技術(shù)簡(jiǎn)介： Hoechst染料都可在350nm左右的紫外光激發(fā)。都在461nm處發(fā)出藍(lán)靛色熒光光。Hoechst染色時(shí)無需用 DAB來顯色，它直接結(jié)合細(xì)胞的DNA ，經(jīng)過紫外光激發(fā)后發(fā)出藍(lán)色熒光。

【星森林生物】實(shí)驗(yàn)技術(shù)原理： Hoechst是可以穿透細(xì)胞膜的藍(lán)色熒光染料，對(duì)細(xì)胞的毒性較 低。 熒光染料Hoechst能少許進(jìn)入正常細(xì)胞 膜，使其染上低藍(lán)色，而凋亡細(xì)胞的膜通透性增強(qiáng)，因此進(jìn)入凋亡細(xì)胞中的Hoechst比正常細(xì)胞的多，熒 光強(qiáng)度 要比正常細(xì)胞中要高，此外，凋亡細(xì)胞的染色體DNA的結(jié)構(gòu)發(fā)生了改變從而使該染料能更有效地與 DNA結(jié)合，并且凋亡細(xì)胞膜上的p-糖蛋白泵功能受到損傷不 能有效地將Hoechst排出到細(xì)胞外使之在細(xì)胞 內(nèi)積累增加等都使凋亡細(xì)胞的藍(lán)色熒光增強(qiáng)。

【星森林生物】實(shí)驗(yàn)操作流程：

1、可貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)于含有蓋玻片的培養(yǎng)皿中,或?qū)⒎琴N壁細(xì)胞懸浮培養(yǎng)；

2、將HOECHST加入培養(yǎng)皿,終濃度為10ug/ml,37℃孵育30min；

3、加入4%PF,與培養(yǎng)液1:3混合,固定細(xì)胞5-10min；

4、固定后將長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片用封片劑封于載玻片；

5、熒光顯微鏡下觀察。

客戶提供：

1、組織樣品：新鮮組織放入液氮或-80度保存，組織不少于100mg；

2、培養(yǎng)細(xì)胞：通過細(xì)胞計(jì)數(shù)取不少于2×106個(gè)細(xì)胞于EP管，加入0.5ml生理鹽水或蛋白保護(hù)劑，混勻后保 存于冰箱（-80℃，避免反復(fù)凍融）；

3、血液細(xì)胞標(biāo)本：以抗凝管保存血樣或以淋巴細(xì)胞分離液分離細(xì)胞后加入0.5ml生理鹽水或蛋白保護(hù)劑， 保存（-80℃可長(zhǎng)期保存，避免反復(fù)凍融）；

4、血清或細(xì)胞培養(yǎng)液標(biāo)本：離心去掉雜質(zhì)后取上清入EP管，保存（4℃可保存15-20天，-80℃可長(zhǎng)期保 存，避免反復(fù)凍融）；

5、石蠟切片，冰凍切片以及細(xì)胞爬片，涂片等。

6、樣本運(yùn)輸：可選擇以下任何一種方式寄送標(biāo)本 - 組織樣本、細(xì)胞樣本以干冰運(yùn)輸或加入蛋白保護(hù)劑后，加冰袋寄送； - 細(xì)胞樣本也可直接寄送培養(yǎng)瓶（密封保證不污染、培養(yǎng)液不漏出）； - 血清或上清液直接加冰袋寄送（送視路程遠(yuǎn)近2-3天可到達(dá)）。

交付標(biāo)準(zhǔn)：

1、圖片；

2、完整項(xiàng)目報(bào)告（材料、試劑、儀器、方法、數(shù)據(jù)分析、實(shí)驗(yàn)結(jié)果）。 

其他：

1、Hoechst能與DNA結(jié)合，干擾DNA復(fù)制和細(xì)胞分裂，因此有致畸和致癌危險(xiǎn)。使用和廢棄需謹(jǐn)慎。

2、對(duì)于貼壁細(xì)胞或組織切片，加入少量Hoechst 染色液，覆蓋住樣品即可。對(duì)于懸浮細(xì)胞，至少加入待 染色樣品體積3倍的染色液，混勻。室溫放置3-5分鐘。

3、熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅，染色后的樣品宜避光保存。

細(xì)胞Hochest凋亡染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)

收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)/服務(wù)周期/提供結(jié)果：

歡迎咨詢?cè)斦?，我們?huì)根據(jù)您的方案及需求制定詳細(xì)的服務(wù)協(xié)議。

更多實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)請(qǐng)瀏覽網(wǎng)站其他內(nèi)容！

做實(shí)驗(yàn)，找星森林！您的科研生涯，我們一路相伴！

【平臺(tái)項(xiàng)目開展范圍】慢病毒，腺病毒，RNAi類，分子生物實(shí)驗(yàn)，病理實(shí)驗(yàn)，免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)，細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，蛋白組學(xué)實(shí)驗(yàn)，芯片類實(shí)驗(yàn)，并為廣大客戶朋友們提供課題設(shè)計(jì)指導(dǎo)、基金申請(qǐng)指導(dǎo)等服務(wù)。

 【星森林生物】已開展了數(shù)千個(gè)實(shí)驗(yàn)外包項(xiàng)目。我們專注于醫(yī)學(xué)課題研究，已從課題申請(qǐng)、方案設(shè)計(jì)、試劑采購、模型構(gòu)造、 標(biāo)本檢測(cè)、數(shù)據(jù)分析，各個(gè)環(huán)節(jié)積累了數(shù)千個(gè)成功案例經(jīng)驗(yàn)，為數(shù)千個(gè)來自臨床的科研工作者解決了大量的科研問題。更多相關(guān)實(shí)驗(yàn)服務(wù)信息請(qǐng)咨詢星森林生物。