XSL0124 皮膚損傷模型

皮膚損傷模型

皮膚燒傷模型

(1)復(fù)制方法

去除實驗兔兩后肢內(nèi)側(cè)大腿被毛約6cm×8cm區(qū)域，在該部位兩側(cè)安置銅制電極板(3cm×3cm)并固定，右側(cè)為進口，左側(cè)為 出口。在非麻醉狀態(tài)下實施電擊，電擊時間為5s，額定電壓10kV，實際通過電流為(2±0.15)A，皮膚電阻為2500Ω，電擊后 迅速解除電極板。

(2)模型特點

外觀檢查：在解除電極板后，局部皮膚與周圍未接觸面比較：較堅硬且界線清楚。外圍為黑色的狹窄環(huán)，略高于邊緣，并有 1～2鋤碳化中心，近中心處為灰白堅韌的壞死皮膚，稍呈凹陷。切開皮膚，觸摸肌肉略腫脹，色澤不均勻，呈灰紅相間，組 織疏松、易撕裂、缺乏彈性。該層可見小血管栓塞，深層肌肉略呈暗紅色，局部可見凝血。肌肉受損范圍尚不清楚。傷后4 ～28h，外表皮膚燒傷區(qū)界線更趨明顯；整個創(chuàng)面呈灰白色，但滲出不明顯；局部腫脹加劇，質(zhì)地堅硬形似皮革。較大血管 出現(xiàn)繼發(fā)性的栓塞或凝血。組織壞死波及范圍漸擴大，出現(xiàn)整柬肌肉損壞，尤其是深部組織壞死逐步形成。正常肌纖維、間 生態(tài)組織、片狀肌肉凝固性壞死交叉并存。傷后5～7d，皮膚潰破、肌肉翻裂，局部腫脹漸減輕，創(chuàng)面惡臭，感染嚴(yán)重，并 有膿液流出，炎性浸潤累及原正常區(qū)域。創(chuàng)面變成暗灰或出現(xiàn)暗紅色的出血斑點，皮膚潮解，燒傷組織的剝脫程度加重。深 部組織發(fā)生糜爛，可見明顯的血管栓塞現(xiàn)象。神經(jīng)、肌腱等均暴露。而正常兔皮膚光澤滑潤，肌束排列規(guī)則，色澤均勻，血 管走向清晰可見。

光鏡檢查見：電燒傷早期皮膚呈玻璃樣變，皮下有凝固性壞死，問質(zhì)充血，水腫，肌纖維結(jié)構(gòu)模糊，肌絲融合成團塊狀或空 泡狀。傷后24～48h時，真皮淺表有廣泛性化膿性壞死。深部組織呈均質(zhì)樣變，內(nèi)有炎性細胞浸潤。血管充血明顯，大部分 小動、靜脈有出血，近病變處的肌纖維大部分凝固溶解，肌內(nèi)有明顯淤血、充血，并有神經(jīng)變性。傷后3～5d，表皮壞死潰 瘍形成，真皮下大量化膿，血管壁有血栓形成，部分動脈有壞死，間質(zhì)充血、出血，部分神經(jīng)索崩解。肌纖維有灶性瘢痕， 部分溶解，zhong央?yún)^(qū)有大片壞死，個別有脂肪變、空泡變。7d后可見大量肉芽組織修復(fù)明顯。正常切片所見：皮膚結(jié)構(gòu)完整， 肌纖維排列整齊，細胞核正常，未見血管充血現(xiàn)象。

(3)比較醫(yī)學(xué)

盡管熱力燒傷也發(fā)生進行性壞死，但用熱力損傷的理論和實踐難以解釋電損傷組織進行性和夾心樣壞死等一些臨床常見的現(xiàn) 象。臨床實踐中所見絕大部分為1萬V以上的電燒傷，實驗中避免了有電弧引起的燒傷，使電擊后局部損傷的性質(zhì)為電接觸 燒傷，而不是電弧燒傷，并使其基本接近于日常系統(tǒng)線路上操作時不慎引起的電燒傷。電燒傷后局部創(chuàng)面的燒傷情況和臨床 所見高壓電燒傷基本相同，創(chuàng)面的發(fā)展情況也相似。這說明使用該高壓電放電裝置實施動物實驗，可基本反映臨床電燒傷的 情況。

燒傷燙傷(TI)小鼠模型

模式動物品系：SPF級Balb/C小鼠，健康，雄性，4~6W，體重為18g~20g。

實驗分組：實驗分六組：正常對照組、模型組、陽性藥組、受試藥組三個劑量組。

實驗周期：4-6 weeks

建模方法：

1. 燒傷造模過程： 戊巴Bi妥鈉麻醉小鼠后，用剃毛器剃去小鼠背部毛，并使用硫H鈉于背部進行脫毛處理至無毛。將小鼠四肢和尾部固定于超 凈臺上，間隔排列，將水浸濕的帶控制燒傷面積的紙片放在小鼠背部（2.0cm×3.5cm=7.0 cm2，占體表面積10％），用滴 管滴加乙醇，浸滿皮膚，打火機點燃，啟動秒表計時，到時用濕布熄火，將小鼠放回鼠籠。需進行預(yù)實驗確定合適的燒傷時間。

2. 燒傷后護理： 燒傷后當(dāng)天，各組小鼠腹腔注射葡萄糖鹽水0.3-0.4 mL，第2天灌胃牛奶0.2-0.3 mL。第3天，正常小鼠與燒傷小鼠各取1只 處死，取材。治療方式為：A、B組于傷口處涂抹藥物，C組于傷口處均勻噴上噴劑。燒傷后7天內(nèi)每天早晚各給藥一次，厚 度為1mm；第8天起每天給藥一次。3.取材： 于燒傷后2、7、14、30、45、60天分別處死A、B組各1只小鼠。處死小鼠之前，記錄小鼠體重和創(chuàng)面的變化（拍大體照， 盡可能每只鼠拍照的角度一致）。 取材：老鼠麻醉后摘眼球取血，提血清，置于-80度保存。燒傷創(chuàng)面分2份，一份置于福爾馬林保存用于后期病理染色，另一 份置于液氮快速冷凍置于-80度保存。

模型評價：

皮膚觀察： 觀察傷處愈合情況，記錄小鼠體重變化、創(chuàng)面愈合時間、感染情況、愈合后瘢痕情況，創(chuàng)面愈合率等，拍大體照，盡可能每 只鼠拍照的角度一致。

組織病理學(xué)： HE染色：對皮膚進行病理檢查和觀察：將燒傷創(chuàng)面連同周邊皮膚約0.5 cm取下，平鋪于濾紙上，然后固定于10％ 福爾馬林 內(nèi)，縱向和橫向切取寬約3-4 mm皮膚，按常規(guī)制備石蠟切片，切片厚度為5 μm，蘇木素一伊紅(HE)染色，用顯微鏡觀察并 照相。

 IHC染色：取石蠟切片，進行Ki67染色。

皮膚損傷模型

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