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流式檢測細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度
參考價 | ¥ 200 |
訂貨量 | ≥10件 |
- 公司名稱 伊萊博生物科技(上海)有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 代理商
- 更新時間 2024/6/17 13:25:52
- 訪問次數(shù) 504
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1.Fluo/Am儲存液配制:將Fluo/Am溶于DMSO,配成終濃度為2mmol/L的儲存液,分裝,-70度凍存。
2.懸浮細(xì)胞染色:收集細(xì)胞并調(diào)整細(xì)胞濃度至2*10^6個/ml,加Fluo/Am至終濃度為5-10umol/L,置于,5%CO2。37度避光,孵育30-60min,其間輕輕振蕩幾次,并設(shè)置陰性對照(不加Fluo/Am)。
3.貼壁細(xì)胞染色:以5*10^5個細(xì)胞種植于24孔培養(yǎng)板中,置于5%CO2。37度培養(yǎng)一段時間,加入Fluo/Am至終濃度為5-10umol/L,置于5%CO2。37度避光,孵育30-60min。其間輕輕振蕩幾次,并設(shè)置陰性對照。
4.取出細(xì)胞或消化細(xì)胞,離心1500r/min 10min,去除多余染料,再用無鈣緩沖液沖洗PBS反復(fù)離心洗滌2次,最后用無鈣PBS重懸至0.5ml。
5.進(jìn)行流式檢測分析
結(jié)果分析:用488mm激發(fā),F(xiàn)LI-H熒光通道收集熒光信號,收集1*10^4個細(xì)胞,細(xì)胞內(nèi)鈣的濃度用平均熒光表示。