兔冠狀動脈內皮細胞

本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！

產(chǎn)品名稱：兔冠狀動脈內皮細胞

組織來源：冠狀動脈

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)信息：

包被條件：PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）

培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態(tài)：內皮細胞樣

傳代特性：可傳2-3代

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

兔冠狀動脈內皮體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。

細胞簡介：

兔冠狀動脈內皮分離自冠狀動脈組織；冠狀動脈是供給心臟血液的動脈，起于主動脈根部，分左右兩支，行于心臟表面。采用Schlesinger等的分類原則，將冠狀動脈的分布分為三型：右優(yōu)勢型、均衡型、左優(yōu)勢型。左右冠狀動脈是升主動脈的對分支。左冠狀動脈為一短干，發(fā)自左主動脈竇，經(jīng)肺動脈起始部和左心耳之間，沿冠狀溝向左前方行后，立即分為前室間支和旋支。前室間支沿前室間溝下行，旋支繞過心尖切跡至心的膈面與右冠狀動脈的后室間支相吻合。冠狀動脈內皮細胞呈單層扁平分布，是一薄層的專門上皮細胞，它形成冠狀動脈的內壁，是血管管腔內血液及其他血管壁（單層鱗狀上皮）的接口。內皮細胞是沿著整個循環(huán)系統(tǒng)，由心臟直至最小的微血管。

方法簡介：

實驗室分離的兔冠狀動脈內皮采用混合酶短暫消化后組織貼塊、結合內皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

實驗室分離的兔冠狀動脈內皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)步驟：

一、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

二、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

a）、對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。

3.輕輕吹打細胞，脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液，將細胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。

b）、對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠白介素 -12 (mouse IL-12)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國 Biosource

小鼠白介素 -12(p40) (mouse IL-12 p40)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國 R&D

小鼠白介素 -12(p70) (mouse IL-12 p70)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   奧地利 Bender

小鼠白介素 -13(p70) (mouse IL-13)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國 Biosource

小鼠壞死因子相關凋亡誘導配體1(AIL-R1)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human ai cardiolipin aibody IgG (ACA-IgG) ELISA Kit 人抗心0脂抗體IgG(ACA-IgG)試劑盒

HumanAdenosinediphosphate,ADPELISAKit 人二0酸腺苷(ADP)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforACA(Humanai-cenolandcenosomeaibody)ELISAKit人抗中性粒/中心體抗體

一步法平端PCR反應液50次

MouseOncostatin-M,OSMELISAKit小鼠抑瘤素M(OSM)試劑盒規(guī)格：96T/48T

Opticin蛋白抗體

聚磷酸肌醇磷酸酶5A抗體

SMPD1重組小鼠 SMPD1 / ASM 蛋白 Protein

白介素1α(IL1α)重組蛋白 Recombinant Interleukin 1 Alpha (IL1a)

CPNE1重組人 CPNE1 / Copine I / CPN1 蛋白 Protein

ERN1 Protein Human 重組人 ERN1 / IRE1 蛋白 (aa 465-977, His & GST 標簽)

IFNAR1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IFNAR1 / IFNAR 蛋白 (Fc 標簽)

APP695-770 (Amyloid protein precursor 0.5mgAPP695-770 (Amyloid protein precursor) 淀粉樣肽前體蛋白(多肽抗原)

ERN1 Protein Human 重組人 ERN1 / IRE1 蛋白 (aa 465-977, His & GST 標簽)

EFNB1重組小鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 Protein

CNTN3 Protein Rat 重組大鼠 Contactin 3 / CNTN3 蛋白

MS4A1重組人 CD20 / MS4A1 蛋白 (aa 213-297, His 標簽) Protein

兔冠狀動脈內皮細胞大鼠卵白蛋白(OVA)試劑盒 ，英文名： OVA ELISA Kit

Mouse insulin like growth factor binding protein 4 (IGFBP-4) ELISA Kit 小鼠胰島素樣生長因子結合蛋白4(IGFBP-4)試劑盒

RatHeatShockProteinglycoprotein96,HSPgp96ELISAKit 大鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSPgp96)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforGDI(HumanGuaninenucleotidedissociationInhibitor)ELISAKit人鳥苷酸解離抑制因子

細胞元素比色法定量試劑盒20次

RatsecretoryimmunoglobulinA,sIgAELISAKit大鼠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)試劑盒規(guī)格：96T/48T

收到細胞如何處理？

1、首先，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）。

2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

3、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如貼壁特性（貼壁/懸浮）、細胞形態(tài)、所用基礎培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。

4、靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。

5、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng)基，預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。

6、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內液體全部轉移至50ml無菌離心管內，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細胞密度未超過80%，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作