Dxy MMESSAGE MMACHINE T7 KIT 25RXNS
具體成交價以合同協(xié)議為準
- 公司名稱 賽默飛世爾科技(中國)有限公司
- 品牌 Invitrogen
- 型號
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2025/1/17 16:28:30
- 訪問次數(shù) 39
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- mMESSAGE mMACHINE 試劑盒設(shè)計用于體外合成大量的加帽 RNA。加帽 RNA 能模擬體內(nèi)發(fā)現(xiàn)的大多數(shù)真核 mRNA,因為其在 5' 末端有一個 7-甲基鳥苷帽結(jié)構(gòu)。mMESSAGE mMACHINE 試劑盒反應(yīng)包括超高得率轉(zhuǎn)錄反應(yīng)中的帽類似物 [m7G(5')ppp(5')G]。帽類似物僅作為轉(zhuǎn)錄本的個或 5' 末端 G 摻入,因為其結(jié)構(gòu)使得無法在 RNA 分子中的其他位置將其摻入。
mMESSAGE mMACHINE 試劑盒如何工作
mMESSAGE mMACHINE 試劑盒有簡化的反應(yīng)形式,其中所有 4 個核糖核苷酸和帽類似物混合于單一溶液中。該溶液的帽類似物:GTP 比值為 4:1,這是盡可能提高 RNA 得率和加帽轉(zhuǎn)錄本比例的理想選擇。mMESSAGE mMACHINE 試劑盒是對加帽 RNA 進行卵母細胞顯微注射、體外翻譯、轉(zhuǎn)染和其他應(yīng)用的常規(guī)合成的理想選擇。在存在高核苷酸濃度的情況下,通過優(yōu)化 RNA 合成的反應(yīng)條件來實現(xiàn)高得率。此外,合成的 RNA 不會被任何可能含有 RNase 抑制劑(酶混合物的組分)的污染性核糖核酸酶降解。
使用 mMESSAGE mMACHINE 試劑盒
在 2 小時孵育期間的 20 µL 反應(yīng)中,mMESSAGE mMACHINE 高得率加帽 RNA 轉(zhuǎn)錄將產(chǎn)生大量的加帽 RNA。該方法獲得的得率為使用常規(guī)體外轉(zhuǎn)錄反應(yīng)的 10–50 倍。帽類似物與 GTP 的比值已經(jīng)過優(yōu)化,能夠在得率 (15–35 µg) 和加帽轉(zhuǎn)錄本的比例 (80%) 之間實現(xiàn)良好折衷。mMESSAGE mMACHINE 試劑盒還包含一個 LiCl 沉淀溶液,該溶液可有效分離來自加帽 RNA 的蛋白和未摻入的核苷酸(包括自由帽類似物),提高翻譯效率。mMESSAGE mMACHINE 試劑盒僅針對與試劑盒中包含的聚合酶配合使用進行了優(yōu)化。使用不同的聚合酶可能會導致得率低。mMESSAGE mMACHINE 試劑盒包含 25 次轉(zhuǎn)錄反應(yīng)所需的所有緩沖液和試劑。使用試劑盒提供的對照模板(非洲蟾蜍延伸因子 1α,pTRI Xef),每次 mMESSAGE mMACHINE 反應(yīng)將使用 T3 或 T7 RNA 聚合酶產(chǎn)生約 20–30 µg 的 RNA,或使用 SP6 RNA 聚合酶產(chǎn)生約 15–25 µg RNA。