本文介紹了利用 Agilent 1290 Infinity Ⅱ 超高效液相色譜 (UHPLC) 系統(tǒng)和 Agilent 6125C  單四極桿質(zhì)譜檢測器對 ADC 藥物中游離的小分子毒素 MMAE 和 vc-MMAE 進行定量的兩 種分析方法。方法一無需進行復(fù)雜的樣品前處理，其采用 Agilent PLRP-S 色譜柱 (2.1 × 50 mm, 5 μm, 1000 Å) 并以含 0.1% 甲酸的乙腈和含 0.1% 甲酸的水溶液作為流動相，用 梯度洗脫方法在 20 分鐘內(nèi)分離游離小分子 MMAE、vc-MMAE 和蛋白等基質(zhì)，然后通過 閥切換將目標(biāo)分析物切入質(zhì)譜進行檢測，并將基質(zhì)切入廢液，操作方便，具有良好的線 性、精密度和準(zhǔn)確度。方法二在樣品經(jīng)過有機溶劑沉淀去除蛋白基質(zhì)后，用 Poroshell  120 SB-C8 色譜柱 (3.0 × 50 mm, 2.7 μm) 分離 MMAE 和 vc-MMAE，其同樣具有良好的線 性、精密度和準(zhǔn)確度，且與方法一相比，具有更高的靈敏度。這兩種分析方法為生物制 藥企業(yè)監(jiān)測抗體偶聯(lián)藥物中的游離小分子 MMAE 和 vc-MMAE 提供了可選的解決方案。

• AgilentInfinityLabLC/MSD系統(tǒng)

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