北京迪科馬科技有限公司(迪馬科技)
【新方案】GB 5009.288-2023 食品中胭脂蟲(chóng)紅的測(cè)定
檢測(cè)樣品:食品
檢測(cè)項(xiàng)目:胭脂蟲(chóng)紅
方案概述:迪馬科技參考《GB5009.288-2023食品中胭脂蟲(chóng)紅的測(cè)定》,建立了食品中胭脂蟲(chóng)紅的測(cè)定方案,本方案重現(xiàn)了國(guó)標(biāo)方法,采用ProElutPXA固相萃取柱凈化樣品,DiamonsilPlusC18色譜柱分離,HPLC-PDA檢測(cè),外標(biāo)法定量,定量限與標(biāo)準(zhǔn)方法一致,回收率在90%~110%之間。
食品中胭脂蟲(chóng)紅的測(cè)定
SPE-HPLC法
胭脂蟲(chóng)紅其主要活性成分為胭脂紅酸,是一種蒽醌衍生物,來(lái)源于雌性胭脂蟲(chóng)的天然紅色色素。近年來(lái), 胭脂蟲(chóng)紅在多種食品中均有添加, 如肉制品、奶制品、果凍、餅干等。我國(guó)的《GB 2760-2014 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)》中規(guī)定食品中胭脂蟲(chóng)紅的使用范圍和最大使用量。
食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《GB 5009.288-2023 食品中胭脂蟲(chóng)紅的測(cè)定》于2023年9月6日發(fā)布,2024年3月6日實(shí)施,標(biāo)準(zhǔn)中樣品經(jīng)鹽酸溶液提取,混合型強(qiáng)陰離子交換固相萃取柱凈化,C18色譜柱分離測(cè)定。
迪馬科技參考《GB 5009.288-2023 食品中胭脂蟲(chóng)紅的測(cè)定》,建立了食品中胭脂蟲(chóng)紅的測(cè)定方案,本方案重現(xiàn)了國(guó)標(biāo)方法,采用 ProElut® PXA固相萃取柱凈化樣品,Diamonsil® Plus C18色譜柱分離,HPLC-PDA檢測(cè),外標(biāo)法定量,定量限與標(biāo)準(zhǔn)方法一致,回收率在90%~110%之間。
本方案適用于果粒橙、果凍、火腿、酸奶、棒棒糖、黑巧克力和調(diào)制乳粉等樣品中胭脂蟲(chóng)紅的測(cè)定。
本方法的定量限為:當(dāng)稱(chēng)樣量為2g時(shí),液體及半固體試樣(含乳半固體除外)中胭脂蟲(chóng)紅(以胭脂紅酸計(jì))定量限為0.02g/kg,固體及含乳半固體試樣(調(diào)制乳粉除外)中胭脂蟲(chóng)紅(以胭脂紅酸計(jì))定量限為0.04g/kg,調(diào)制乳粉中胭脂蟲(chóng)紅(以胭脂紅酸計(jì))定量限為0.1g/kg。
(1) 標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(1.0mg/mL)(Cat.#:48204):準(zhǔn)確稱(chēng)取10.0mg標(biāo)準(zhǔn)品,用水溶解,并定容至10mL容量瓶中,搖勻。
(2) 標(biāo)準(zhǔn)系列工作液:分別準(zhǔn)確吸取標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(1.0mg/mL):0.05mL、0.1mL、0.2mL、0.5mL、1.0mL于10mL容量瓶中,用0.1%磷酸水溶液定容至刻度,搖勻,配制成質(zhì)量濃度分別為5.00mg/L、10.0mg/L、20.0mg/L、50.0mg/L和100mg/L標(biāo)準(zhǔn)系列工作液。
3.1 液體及半固體試樣(含乳半固體除外)
稱(chēng)取2g試樣于50mL離心管中,加入40mL鹽酸溶液(2.0mol/L),搖勻,置于沸水浴中加熱30min,取出冷卻至室溫后,振蕩5min,超聲5min,5000rpm離心5min,上清液轉(zhuǎn)移至50mL容量瓶中,用水定容至刻度,經(jīng)適量脫脂棉過(guò)濾,待凈化。
3.2 固體及含乳半固體試樣(調(diào)制乳粉除外)
稱(chēng)取2g試樣于50mL離心管中,加入40mL鹽酸溶液(2.0mol/L),搖勻,置于沸水浴中加熱30min,取出冷卻至室溫后,振蕩5min,超聲5min,5000rpm離心5min,上清液轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶中,殘?jiān)尤?0mL鹽酸溶液(2.0mol/L),常溫條件下,重復(fù)提取一次,合并兩次提取液,用水定容至刻度,經(jīng)適量脫脂棉過(guò)濾,待凈化。
3.3 調(diào)制乳粉
稱(chēng)取2g試樣于50mL離心管中,加入40mL鹽酸溶液(2.0mol/L),搖勻,置于沸水浴中加熱30min,取出冷卻至室溫后,振蕩5min,超聲5min,5000rpm離心5min,上清液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,殘?jiān)尤?0mL鹽酸溶液(2.0mol/L),常溫條件下,重復(fù)提取兩次,合并三次提取液,用水定容至刻度,經(jīng)適量脫脂棉過(guò)濾,待凈化。
ProElut® PXA 150mg/6mL(Cat.#:68304)
(1)活化:依次加入6mL甲醇、6mL水,棄去流出液;
(2)上樣:將25mL待凈化液加入柱中,棄去流出液;
(3)淋洗:依次加入12mL水、6mL甲醇,棄去流出液,真空抽至柱體近干;
(4)洗脫:加入6mL 2%磷酸甲醇溶液,收集洗脫液;
(5)重新溶解:將洗脫液在40℃水浴下氮?dú)獯抵两?,?.1%磷酸水溶液定容至2mL,渦旋混勻,8000rpm離心5min,取清液上機(jī)分析。
色譜柱:Diamonsil® Plus C18 150x4.6mm,5μm(Cat.#:99401)
流 速:1.2mL/min
進(jìn)樣量:10μL
柱 溫:40℃
檢測(cè)器:PDA 494nm
流動(dòng)相:A:0.1%磷酸水溶液 B:0.1%磷酸乙腈溶液
梯度設(shè)置:
食品中胭脂蟲(chóng)紅的HPLC檢測(cè)的添加回收結(jié)果。
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