內(nèi)毒素介導(dǎo)因子之IL-6蛋白質(zhì)的特點(diǎn)

上一篇文章介紹了白細(xì)胞介素-6（interlenkin 6，1L-6）的產(chǎn)生和調(diào)節(jié)，這一篇文章介紹白細(xì)胞介素-6蛋白質(zhì)的特點(diǎn)。

從IL-6的cDNA序列中得知，IL-6蛋白有184個(gè)氨基酸殘基，不同的實(shí)驗(yàn)室報(bào)道IL-6的相對(duì)分子質(zhì)量不同，在19000~30000之間。小鼠IL-6缺乏糖化反應(yīng)，人類IL-6相對(duì)分子質(zhì)量不同是由于糖化的程度不同所致。在單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的IL-6產(chǎn)物中，IL-6存在N-連接糖化和O-連接糖化反應(yīng)，以及在不同的絲氨酸殘基上發(fā)生磷酸化反應(yīng)。人IL-6的未成熟前體由212個(gè)氨基酸殘基組成，小鼠和大鼠的IL-6由211個(gè)氨基酸殘基組成，牛的IL-6由210個(gè)氨基酸殘基組成。其中一個(gè)典型信號(hào)肽經(jīng)加工后被切除，變成184個(gè)氨基酸的成熟的IL-6蛋白。

天然成熟的IL-6是單條肽鏈的糖蛋白，相對(duì)分子質(zhì)量根據(jù)來(lái)源細(xì)胞不同而不同，這是由于翻譯后經(jīng)過加工所造成的。相對(duì)分子質(zhì)量為23000~25000的IL-6無(wú)O-GalNAc型聚糖，而相對(duì)分子質(zhì)量為28000~30000的IL-6存在N-GalNAc型聚糖和O-GalNAc型聚糖，天然IL-6有多處絲氨酸殘基發(fā)生磷酸化，但是磷酸化程度在各種組織均不同。硫酸化修飾也很常見，多數(shù)在多聚糖的外鏈及酪氨酸殘基側(cè)鏈上，因此造成IL-6分子所帶的電荷和相對(duì)分子質(zhì)量均有不同。這種翻譯后的修飾反應(yīng)的生物學(xué)意義未完-全闡明，對(duì)IL-6的基本生物學(xué)活性并無(wú)顯著的影響，因?yàn)?/span>IL-6的生物學(xué)活性主要取決于其肽鏈的氨基酸序列。

IL-6肽鏈具有4個(gè)Cys殘基，位置完-全保守，人和鼠的IL-6Cys殘基分別位于44、50、73、83位，Cys44-Cys50和Cys73-Cys83各形成一對(duì)二硫鍵，處于暴露位置，具有重要作用。其中第二對(duì)二硫鍵的作用比第一對(duì)二硫鍵在維持IL-6的生物學(xué)活性上更為重要，二硫鍵除了可穩(wěn)定IL-6的空間構(gòu)象外，還可使IL-6蛋白質(zhì)能夠正確折疊成三維結(jié)構(gòu)，以維持IL-6中受體結(jié)合區(qū)的完整性。如果人為地用化學(xué)試劑還原這兩對(duì)二硫鍵，則IL-6的活性完-全喪失。在不同物種，這兩個(gè)半胱氨酸殘基之間（50~73位）的9個(gè)氨基酸殘基的序列相同，說(shuō)明成熟的IL-6半胱氨酸富集中間區(qū)域?qū)?/span>IL-6的生物學(xué)作用也起到關(guān)鍵性作用。重組技術(shù)合成的人IL-6蛋白質(zhì)中，雖缺乏半胱氨酸﹐但也具有活性，說(shuō)明IL-6的相關(guān)信息能夠促使肽鏈折疊成有活性的構(gòu)象，且并不一定需要半胱氨酸的存在。

人IL-6分子有5個(gè)Met殘基，除了Met67之外，其他均可以人為地氧化，氧化的容易程度大小依次為Met49、Met117，Met184和 Met161，其中Met161對(duì)受體結(jié)合至關(guān)重要。鼠IL-6在34和157位含有2個(gè)Trp殘基，位于分子的表面，其中Trp34參與蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)的相互作用，Trp157則位于受體結(jié)合區(qū)域的附近。

色諧分析顯示，重組的IL-6蛋白含有較多的α螺旋，占67%，β折疊占15%，β轉(zhuǎn)角占18%，其余為無(wú)序的卷曲結(jié)構(gòu)。磁共振分析顯示，分子的N端有15～22個(gè)殘基長(zhǎng)度的松散結(jié)構(gòu)，整個(gè)分子以α螺旋緊密結(jié)構(gòu)為主，Thr20-Lys46為第一組螺旋（A）、Glu80-Asn103為第二組螺旋（B），Glu108-Lys129為第三組螺旋（C），GIn156-Met184為第四組螺旋（D）。A組和B組以長(zhǎng)的AB襟連接，形成平行排列;而C組和B組以短的禪連接，形成B組和C組反平行，D組和C組也以長(zhǎng)的裨連接，導(dǎo)致C和D組也是平行排列，因此四組螺旋處于上上下下的布局中。圖10-1所示為IL-6家族的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。