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菌落總數(shù)測試片檢測方法
閱讀:2701 發(fā)布時間:2017-12-12 方法原理:將營養(yǎng)培養(yǎng)基、凝膠和氯化三苯基四氮唑(TTC)顯色劑等加載在試紙片,經(jīng)加樣、培養(yǎng)后,細菌菌落在測試片上顯現(xiàn)出紅色菌斑,通過計數(shù)報告結(jié)果。
檢測方法:
1.樣品處理:無菌稱取樣品25g(或25mL)放入含有225mL無菌生理鹽水的采樣瓶或均質(zhì)杯內(nèi),經(jīng)充分振搖(均質(zhì))做成1:10的稀釋液。用1mL滅菌吸管吸取1:10稀釋液1mL,注入含有9mL滅菌生理鹽水的試管內(nèi),用1mL滅菌吸管反復(fù)吸吹制成1:100的稀釋液。以此類推,做出1:1000等稀釋度的稀釋液,每個稀釋度更換一支滅菌吸管。
2.接種:一般食品選2~3個稀釋度進行檢測,含菌量少的液體樣品(如食用純水和礦泉水等)可直接用原液檢測。將測試片放在水平臺面上,揭開上面的透明薄膜,用滅菌吸管吸取樣品原液或稀釋液1mL,均勻加到中央的紙片上,輕輕將上蓋膜放下,靜置5 min使培養(yǎng)基凝固,zui后用手輕輕地壓一下。每個稀釋度接種兩片。
3.培 養(yǎng):將測試片疊在一起放回原自封袋中,透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi),堆疊片數(shù)不超過12片。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃,培養(yǎng)15~24h。
4.結(jié)果判斷與計數(shù):
細菌在紙片上生長后會顯示紅色斑點,選擇菌落數(shù)適中(10個~100個)的紙片進行計數(shù),乘以稀釋倍數(shù)后即為每克(或毫升)樣品中所含的細菌菌落總數(shù)。菌落數(shù)在100以內(nèi)時,按實有數(shù)報告。大于100時,用二位有效數(shù)字,二位有效數(shù)字后面的數(shù)字,以四舍五入方法計算,并以10的指數(shù)來表示。
注意事項:使用過的紙片上帶有活菌,需及時按照生物安全廢棄物處理原則進行處理。