詳細(xì)介紹 操作程序 加樣反應(yīng):取出所需量的反應(yīng)板條,每孔加樣本稀釋液(5號液)2滴,再分別加入待檢的血清樣本10ul,混勻。同時(shí)設(shè)陰性、陽性及空白對照各一孔;陰性、陽性對照不用再稀釋,直接加樣100ul即可,空白對照孔僅加入樣本稀釋液(5號液)2滴。37℃避光反應(yīng)30分鐘后甩去孔內(nèi)液體,每孔加洗滌液(2號液)1滴,立即用蒸餾水注滿,靜置30秒后甩去,再直接用蒸餾水洗滌四次,甩去,拍干。 加酶反應(yīng):除空白對照孔外其余每孔加酶結(jié)合物(1號液)2滴,37℃避光反應(yīng)30分鐘后甩去孔內(nèi)液體,如上洗滌,拍干。 顯色反應(yīng):加底物(3號液)和顯色劑(4號液)各1滴,混勻,37℃下避光顯色10分鐘。加終止液(6號液)1滴,混勻,終止反應(yīng)(加終止液后藍(lán)色會變?yōu)辄S色)并判讀結(jié)果。結(jié)果判斷 肉眼觀察:陰性對照接近無色,陽性對照呈明顯黃色,表示試驗(yàn)有效。待檢孔接近無色表示該標(biāo)本為陰性,待檢孔呈明顯黃色表示該標(biāo)本為陽性。 儀器判斷:以空白對照調(diào)零用酶標(biāo)儀于450nm(620nm作參比波長)讀取O.D值,待檢孔O.D值大于陰性對照2.1倍者為陽性。當(dāng)陰性對照O.D值低于0.05時(shí)按0.05計(jì)算。