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如何選擇二抗之一—根據(jù)一抗種屬及類型選擇二抗
2010-5-5 閱讀(2103)
檢測(cè)任何目的靶蛋白都有不止一種抗體可供選擇,同時(shí)在后繼試驗(yàn)中也會(huì)有不同的檢測(cè)方案,因此在選擇二抗的時(shí)候要綜合考慮一抗的類型及后繼檢測(cè)方案的要求,其中如何根據(jù)一抗的種屬來源和類型選擇二抗尤為重要。
一抗的種屬來源:
二抗應(yīng)選用與使用的一抗相同的物種來源,例如:如果你的一抗是小鼠源的單克隆抗體,二抗則選抗小鼠的二抗(山羊抗小鼠或者兔抗小鼠等均可);如果一抗是從兔血清里制備的兔源多克隆抗體,則相應(yīng)的二抗需要選擇抗兔的二抗。即根據(jù)一抗的物種來源選擇相應(yīng)的抗該物種的二抗。西美杰能為您提供zui全的抗不同種屬的*二抗,包括抗小鼠二抗(anti-mouse)、抗兔二抗(anti-rabbit)、抗山羊二抗(anti-goat)、抗綿羊二抗(anti- sheep)、抗人二抗(anti-human)、抗豚鼠二抗(anti- guinea pig)、抗大鼠二抗(anti-rat)、抗豬二抗(anti-swine)、抗馬二抗(anti-horse)、抗牛二抗(anti- bovine)、抗雞二抗(anti- chicken)、抗鴨二抗(anti- duck)等。
另外,為減少二抗與樣本的非特異性結(jié)合,西美杰還能為您提供不同血清吸附的*二抗。如您的檢測(cè)樣本是人源的蛋白,一抗是小鼠源的單克隆抗體,二抗就需要選擇抗小鼠源的二抗,如果您對(duì)實(shí)驗(yàn)的特異性要求很高,那西美杰向您推薦經(jīng)過人血清吸附過的抗小鼠源的二抗,這種二抗由于經(jīng)過人血清吸附而排除了與人源組織(如Fc受體等)可能發(fā)生非特異性反應(yīng)的IgG,因此將非特異性結(jié)合降低到zui低。如HRP Labled Anti-Rabbit IgG (H+L) Antibody, Human Serum Adsorbed二抗就是經(jīng)過人血清吸附過的。而Anti-Mouse IgG (H+L), Extra Serum Adsorbed, Peroxidase-labele二抗則是經(jīng)過多種血清吸附過的二抗。
一抗的類別亞型:
除了要與一抗的種屬來源相一致,二抗還需與一抗的類別或亞類相匹配,這通常是針對(duì)單克隆抗體而言。一般來說多克隆抗體主要是IgG類免疫球蛋白,因此相應(yīng)的二抗就是抗IgG抗體。而單克隆抗體則相對(duì)復(fù)雜些,由于單克隆抗體有不同的類別和亞型,因此相應(yīng)的二抗也需要根據(jù)這些亞型進(jìn)行選擇。
單克隆抗體的類別及亞類通常會(huì)在產(chǎn)品說明書中都會(huì)有描述,如果您的一抗是小鼠IgM,那么相應(yīng)的二抗就應(yīng)當(dāng)是抗小鼠IgM。如果單克隆一抗是小鼠IgG的某一亞類(IgG1,IgG2a,IgG2b,IgG3),那么幾乎所有的抗小鼠IgG都可以與之結(jié)合,或者您也可以選擇專門針對(duì)這一亞類的二抗,例如,如果您的一抗是小鼠IgG1,那么您可以選擇抗IgG1的二抗,此種抗體在雙標(biāo)記實(shí)驗(yàn)中尤其適合。在不清楚一抗為何種類/亞類的情況下,可以選用抗相應(yīng)物種IgG。西美杰能為您提供通用的IgG(H+L)二抗,或者特異性只結(jié)合IgM的Anti IgM (mu) Antibody、IgA的Anti IgA (alpha) Antibody、IgE的Anti IgE (epsilon) Antibody等。
由于在選擇二抗的時(shí)候要綜合考慮一抗的類型及后繼檢測(cè)方案的要求,因此除了需要考慮一抗的種屬及類型外,還需要根據(jù)后繼的檢測(cè)方案選擇不同標(biāo)記的二抗,因此需要對(duì)二抗的標(biāo)記物進(jìn)行選擇。
西美杰備有全面的二抗現(xiàn)貨產(chǎn)品并能提供zui完整的二抗產(chǎn)品線。主要二抗品牌為zui大的二抗和底物生產(chǎn)廠商KPL以及前沿抗體生產(chǎn)商 ProteinTech。按照標(biāo)記分,有HRP、AP、生物素等標(biāo)記二抗,F(xiàn)ITC、TRITC、Rhodamine、Cy3/5、Dylight等熒光二抗;按照檢測(cè)物種分,有抗人、大鼠、小鼠、豬、驢、綿羊、山羊、小雞、馬、兔、倉鼠、狗、牛,以及多種細(xì)菌類二抗;另外,還有IgG、IgA、IgM以及IgG(Fc)、IgG(ab’)2等不同類型抗體。更多產(chǎn)品請(qǐng)隨時(shí)西美杰,西美杰能為您提供一站式的產(chǎn)品和服務(wù)支持。