GoldView（GV）核算染料之技術(shù)說(shuō)明

GoldView™是一種可代替溴化乙錠（EB）的新型核酸染料，采用瓊脂糖電泳檢測(cè)DNA時(shí)，GoldView™與核酸結(jié)合后能產(chǎn)生很強(qiáng)的熒光信號(hào)，其靈敏度與EB相當(dāng)，使用方法與之*相同。在紫外透射光下雙鏈DNA呈現(xiàn)綠色熒光，而且也可用于染RNA。
  通過(guò)Ames試驗(yàn)、小鼠骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核試驗(yàn)、小鼠睪丸精母細(xì)胞染色體畸變?cè)囼?yàn)，致突變性結(jié)果均為陰性；而溴化乙錠（EB）是一種強(qiáng)致癌劑。因此用Goldview™代替EB不失為一種明智的選擇。
  使用方法
  1. 將100ml瓊脂糖凝膠溶液（濃度一般為0.8%~2%）在微波爐中融化。
  2. 加入5µl GoldView，輕輕搖勻，避免產(chǎn)生氣泡。
  3. 冷卻至不燙手時(shí)倒膠，待瓊脂糖凝膠*凝固后上樣電泳。
  4. 電泳完畢在紫外燈下觀察。若使用數(shù)碼相機(jī)照相記錄，則關(guān)閉相機(jī)的閃光燈，放在自動(dòng)檔即可；若使用凝膠成像系統(tǒng)照相，通過(guò)調(diào)節(jié)光圈、曝光時(shí)間，選擇合適的濾光片，可得到成像清晰、背景較低的照片。
  注意事項(xiàng)
  1. 膠厚度不宜超過(guò)0.5cm，膠太厚會(huì)影響檢測(cè)的靈敏度。
  2. 加入GoldView的瓊脂糖凝膠反復(fù)融化可能會(huì)對(duì)核酸檢測(cè)的靈敏度產(chǎn)生一定影響，但不明顯。
  3. 通過(guò)凝膠電泳回收DNA片段時(shí)，建議使用GoldView染色，在自然光下切割DNA條帶，避免紫外線與EB對(duì)目的DNA產(chǎn)生的損傷，可明顯提高克隆、轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)錄等分子生物學(xué)下游操作的效率。
  4. 雖然未發(fā)現(xiàn)GoldView有致癌作用，但對(duì)皮膚、眼睛會(huì)有一定的刺激，操作時(shí)應(yīng)戴上手套。