人外周血淋巴細(xì)胞分離液在競(jìng)爭(zhēng)中優(yōu)勝劣汰
人外周血淋巴細(xì)胞分離液適用于從血液中分離所需細(xì)胞，在醫(yī)療和醫(yī)學(xué)生物學(xué)中廣泛應(yīng)用。本淋巴細(xì)胞分離液為無(wú)菌包裝，未啟封前置于10℃以下易出現(xiàn)白色結(jié)晶，影響分離效果。啟封后短期置4℃保存，分離過程應(yīng)在18-25℃環(huán)境下進(jìn)行。人外周血淋巴細(xì)胞分離液啟封后應(yīng)置于4℃的保存條件下避免微生物污染，從冰箱中取出后不能立即使用，需待溶液溫度升至室溫，搖勻后使用。
整個(gè)分離過程中，溫度應(yīng)控制在18-28℃且在無(wú)菌環(huán)境下，避免微生物污染，否則會(huì)影響分離質(zhì)量。人外周血淋巴細(xì)胞分離液取血采用摘眼球的方法zui多能取2-3ml，大部分只能取1.5ml左右；或者心臟穿刺的方法；另外，不知道你的小鼠是不是還需要繼續(xù)養(yǎng)著，如果不繼續(xù)養(yǎng)，可以采用提取小鼠脾臟淋巴細(xì)胞的方法。人外周血淋巴細(xì)胞分離液加樣后及時(shí)放人孵箱。標(biāo)本較多時(shí)，要分批操作。按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間，防止孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。封板溫育時(shí)，各孔一定要封嚴(yán)，防止陽(yáng)性標(biāo)本的液體蒸發(fā)，產(chǎn)生周邊現(xiàn)象從而導(dǎo)致“花板”的出現(xiàn)。人外周血淋巴細(xì)胞分離液用洗板機(jī)洗板時(shí)，保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料)上輕輕拍干：還要防止針口有纖維蛋白或異物，這些異物在洗板的過程中易產(chǎn)生拖帶現(xiàn)象而導(dǎo)致“花板”的出現(xiàn)。
用人外周血淋巴細(xì)胞分離液分離，稀釋血液只要是等滲的都可以，我們用過PBS生理鹽水都沒有問題。淋巴細(xì)胞培養(yǎng)的過程中，如要求培養(yǎng)1周以上，分離效果分離出來(lái)的淋巴細(xì)胞數(shù)量，培養(yǎng)濃度不宜過低能在1x106細(xì)胞/ml濃度及以上。人外周血淋巴細(xì)胞分離液試劑盒等試劑盒適用于科研實(shí)驗(yàn)，禁用于臨床，嚴(yán)格按照人外周血淋巴細(xì)胞分離液試劑盒說明書進(jìn)行操作。操作前將試劑在室溫下平衡30～60min。人外周血淋巴細(xì)胞分離液合理安排檢測(cè)量，以免反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)，加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用。
