紅細(xì)胞裂解液說明書

紅細(xì)胞裂解液

Cat NO : NH4CL2009 規(guī)格 ：100 mL

產(chǎn)品簡介： 本裂解液有別于市場上銷售的其它紅細(xì)胞裂解液，其配方經(jīng)過本公司優(yōu)化在裂解紅細(xì)胞的同時(shí)不損傷并在一定程度上保護(hù)淋巴細(xì)胞(lymphocyte)或其它有細(xì)胞核的細(xì)胞，所獲得的細(xì)胞可保持完好的生物活性和完整的細(xì)胞形態(tài)。另外，本裂解液中無DNA及RNA酶，配合細(xì)胞分離液使用所提細(xì)胞可廣泛用于細(xì)胞培養(yǎng)及分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，請廣大用戶從優(yōu)選擇。 紅細(xì)胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer)，也稱ACK Lysis Buffer，是一種用于從人或鼠等的血液或組織細(xì)胞樣品中裂解并去除無細(xì)胞核紅細(xì)胞的溶液。 本裂解液不適用于有細(xì)胞核紅細(xì)胞的裂解，例如鳥或禽類的紅細(xì)胞。本裂解液經(jīng)過無菌處理，處理過的血液或組織細(xì)胞樣品可以用于后續(xù)的原代培養(yǎng)、細(xì)胞融合以及核酸或蛋白的提取及各種常規(guī)的分析和檢測。 保存條件： 常溫避光保存，有效期一年。 注意事項(xiàng)： 本裂解液為無菌產(chǎn)品，請注意保持無菌，使用本產(chǎn)品時(shí)宜在超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行。 如果經(jīng)過紅細(xì)胞裂解液處理后的樣品后續(xù)用于總RNA的提取，在處理細(xì)胞時(shí)不必使用經(jīng)過DEPC處理過的溶液。為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。 使用說明： 裂解過程及離心需在4℃的條件下進(jìn)行。 對于細(xì)胞懸液樣品：
1. *次裂解，加入5-8倍細(xì)胞體積的紅細(xì)胞裂解液，輕輕吹打混勻，裂解2min。
2. 300g離心10min，棄紅色上清。
3. 如果發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞裂解不*，可以重復(fù)上述步驟1、2步進(jìn)行短時(shí)多次裂解。但后續(xù)每次加入的紅細(xì)胞裂解液為上一次的一半，但zui少不能低于2ml。裂解液減少到只剩余2ml時(shí)，每次裂解結(jié)束，需先加入10ml PBS進(jìn)行終止，并300g離心10min，棄紅色上清。直至紅細(xì)胞裂解*，裂解結(jié)束。通常極微量的紅細(xì)胞不會(huì)影響后續(xù)的一些檢測。
4. 洗滌1-2次：加入適量PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液，重懸沉淀，300g離心5min，棄上清。洗滌液的用量通常應(yīng)至少為細(xì)胞沉淀體積的5倍。

5. 根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要用適當(dāng)溶液重懸細(xì)胞沉淀后即可進(jìn)行計(jì)數(shù)等后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
對于血液樣品：
1. 取新鮮抗凝血，400-500g離心5min，離心棄血漿。
2. *次裂解，加入5-8倍細(xì)胞體積的紅細(xì)胞裂解液，輕輕吹打混勻，裂解2min。
3. 300g離心10min，棄紅色上清，留沉淀。
4. 如果發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞裂解不*，可以重復(fù)上述步驟2、3步進(jìn)行短時(shí)多次裂解。但后續(xù)每次
加入的紅細(xì)胞裂解液為上一次的一半，但zui少不能低于2ml。裂解液減少到只剩余2ml時(shí)，
每次裂解結(jié)束，需先加入10ml PBS進(jìn)行終止，并300g離心10min，棄紅色上清。直至紅
細(xì)胞裂解*，裂解結(jié)束。通常極微量的紅細(xì)胞不會(huì)影響后續(xù)的一些檢測。
5. 洗滌1-2次：加入適量PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液，重懸沉淀，300g離心5min，
棄上清。洗滌液的用量通常應(yīng)至少為細(xì)胞沉淀體積的5倍。
6. 根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要用適當(dāng)溶液重懸細(xì)胞沉淀后即可進(jìn)行計(jì)數(shù)等后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
注意：對于微量或少量的血液樣品，可以在*步中不進(jìn)行離心棄上清的操作，直接在第二
步中加入10倍血液體積的紅細(xì)胞裂解液，進(jìn)行裂解。對于鼠的血液，裂解時(shí)間稍短，對于人
的外周血，宜延長裂解時(shí)間，具體裂解時(shí)間需客戶自行摸索，以達(dá)到*裂解效果。裂解過
程中宜適當(dāng)搖動(dòng)以促進(jìn)紅細(xì)胞裂解。