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原理：
番茄汁可提供碳源、蛋白質(zhì)等營養(yǎng)物質(zhì)；牛肉膏粉和酵母膏粉提供氮源、維生素和生長因子；葡萄糖和乳糖為可發(fā)酵糖類提供碳源；磷酸氫二鉀為緩沖劑；吐溫-80和乙酸鈉為培養(yǎng)各種乳酸菌提供生長因子，其成分還能抑制某些雜菌；瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。

配方（每升）：

酵母膏粉	5g
牛肉膏粉	10g
乳糖	20g
葡萄糖	2g
磷酸氫二鉀	2g
吐溫-80	1g
乙酸鈉	5g
瓊脂	15g

zui終pH 6.8±0.2

使用方法：
1、切碎洗凈的新鮮番茄，放入三角瓶，置4℃冰箱8～12h，取出后用紗布過濾。稱取本品60g，加入950 ml蒸餾水或去離子水和50ml番茄汁，攪拌加熱煮沸至*溶解，校正pH后分裝三角瓶，121℃高壓滅菌15min。

2、無菌操作將經(jīng)過充分搖勻的檢樣25g（或25mL），放入含有225mL滅菌生理鹽水的滅菌廣口瓶內(nèi)，振搖均勻，即為1：10稀釋液，依次做1：100、1：1000……稀釋。

3、選擇2-3個合適的稀釋度，分別在做10倍遞增稀釋的同時，吸取1mL稀釋液于滅菌平皿中，每個稀釋度做2個平皿。將培養(yǎng)基涼至50℃左右，將培養(yǎng)基注入平皿中約15mL，待瓊脂凝固后，翻轉(zhuǎn)平板，置于36±1℃溫箱中培養(yǎng)72±3h。選擇菌落數(shù)在30-300個之間的平皿進行計數(shù)。計后，隨機挑取5個菌落數(shù)進行革蘭氏染色，顯微鏡檢查并做過氧化氫酶試驗。革蘭氏陽性，過氧化氫酶陰性，無芽孢的球菌或桿菌可定為乳酸菌。根據(jù)證實為乳酸菌落計算出該皿內(nèi)的乳酸數(shù)，然后乘其稀釋倍數(shù)即得每毫升樣品中乳酸菌數(shù)。例如，檢樣10-4的稀釋液在改良TJA培養(yǎng)基平板上，生成的可疑菌落為35個，取5個鑒定，證實為乳酸菌的是4個，則1 mL檢樣中乳酸菌數(shù)為：

4、

35× — ×104＝2.8×105

質(zhì)量控制：

下列菌株接種后于36±1℃培養(yǎng)72h結(jié)果如下：

菌名	菌號	生長狀況	生長特征
保加利亞乳桿菌	As1.1482	良好	平皿底為黃色，菌落中等大小，微白色，濕潤，邊緣不整齊，直徑3±1mm，如棉絮團狀菌落
乳鏈球菌		良好	平皿底為黃色，菌落光滑，微白色，濕潤，邊緣整齊

貯存：貯存于避光、陰涼干燥處。

參考文獻：

GB/T4789.35－2003 中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn) 食品衛(wèi)生微生物檢驗乳酸飲料中乳酸菌檢驗

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