免疫測定中的固相支持物

免疫測定中的固相支持物

    免疫測定中的抗原抗體反應(yīng)是在固相表面上進行的，因此，選擇適當(dāng)?shù)墓滔嗉安捎眠m當(dāng)方法將特定的抗體或抗原吸附于固相上，是成功地建立一個免疫測定方法的基礎(chǔ)。

    免疫測定的固相支持物一般有聚苯乙烯、聚氯乙烯、硝酸纖維素膜等，但目前國內(nèi)外一般均使用聚苯乙烯塑料，我們常用的試劑盒內(nèi)微孔板條就是聚苯乙烯塑料制成的。之所以聚苯乙烯塑料能得到廣泛應(yīng)用，主要是因為這種材料具有很好的光透性和蛋白吸附能力，且很容易加工成試管、微孔板、微球、珠、膜等具體形狀的固相，此外，價格低廉。以前，國內(nèi)廠家生產(chǎn)的用于ELISA測定的聚苯乙烯微孔板條，由于原材料質(zhì)量不高及工藝水平低，造成ELISA測定時的孔間變異大，難以滿足高質(zhì)量的測定要求?，F(xiàn)在國內(nèi)用于微孔板條生產(chǎn)的聚苯乙烯基本上均為進口，工藝水平也有較大提高，故生產(chǎn)的微孔板條用于ELISA測定的孔間變異大大減小，但與國外的高品質(zhì)微孔板條相比，尚有一定差距。

    聚苯乙烯塑料的主鏈結(jié)構(gòu)為碳鏈，側(cè)鏈帶有非極性基團，因此，以聚苯乙烯為原料生產(chǎn)的試管、微孔板和微球等表面呈疏水性。一般認(rèn)為，大分子間可通過范德華力（包括氫鍵）、離子鍵、疏水鍵和共價鍵而產(chǎn)生相互作用。范德華力是大分子間由于定向、誘導(dǎo)和分散效應(yīng)所致的相互作用，作用力很弱。離子鍵是正負(fù)電荷之間的一種靜電吸引作用，但在水溶液中帶電離子更傾向于與水分子形成水合離子，因此，大分子間的離子鍵作用亦很弱。疏水鍵是非極性基團為避開水相而群集在一起的作用力。蛋白質(zhì)分子中含有多種帶非極性側(cè)鏈的氨基酸殘基，這些疏水性側(cè)鏈間以及它們與蛋白質(zhì)主鏈骨架的a—CH基團間傾向于形成疏水鍵。當(dāng)抗體或蛋白抗原被動吸附于固相時，疏水鍵是其吸附于聚苯乙烯等疏水性固相表面的主要作用力。而親水性的生物分子，由于它們與溶液中水分子形成氫鍵的作用力要大于靠疏水鍵與固相的作用力，因而難于被動吸附于疏水性固相表面；同樣，小分子生物活性分子如藥物、多肽等，由于它們分子量小形成疏水鍵的可能性大大降低，故而在固相表面的吸附也比較困難。

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