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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 500微孔(50T) |
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貨號 | PC0020 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),石油 |
主要用途 | 堿性條件下,蛋白將Cu2+還原為Cu+, Cu+與BCA試劑形成紫藍色的絡合物, |
蛋白定量試劑 BCA蛋白濃度測定試劑盒
貨號 :PC0020
規(guī)格 :500 微孔(500T)
保質期 :有效期 1 年。
產(chǎn)品內容 :
包裝(500微孔) | 保存 | |
BCA 試劑 | 100ml | 室溫 |
Cu 試劑 | 3ml | 室溫 |
PBS 稀釋液 | 30ml | 室溫 |
BSA 蛋白標準 (5mg/ml BSA) | 1ml | -20℃ |
產(chǎn)品簡介 :
堿性條件下,蛋白將Cu 2+ 還原為 Cu + , Cu + 與 BCA 試劑形成紫藍色的絡合物,測定其在 562nm 處的吸收值,并與標準曲線對比,即可計算待測蛋白的濃度。常用濃度的去垢劑 SDS,Triton X-100,Tween 不影響檢測結果,但受螯合劑(EDTA,EGTA)、還原劑(DTT,巰基乙醇)和脂類的影響。實驗中,若發(fā)現(xiàn)樣品稀釋液或裂解液本身背景值較高,可試用 Bradford 蛋白濃度測定試劑盒。
操作說明 :
一. 微孔酶標儀法
1. 配制工作液:根據(jù)標準品和樣品數(shù)量,按 50 體積 BCA 試劑加 1 體積 Cu 試劑(50:1)配制成 BCA工作液,充分混勻(混合時可能會有渾濁,但混勻后就會消失)。BCA 工作液室溫 24 小時內穩(wěn)定。
2. 稀釋標準品:取 10 微升 BSA 標準品用 PBS 稀釋 100 微升(樣品一般可用 PBS 稀釋) ,使終濃度為 0.5mg/ml。將標準品按 0, 2, 4, 6, 8, 12, 16, 20 微升加到 96 孔板的蛋白標準品孔中,加 PBS 補足 20 微升。
3. 將樣品作適當稀釋(好多做幾個梯度,如作 2 倍、4 倍、8 倍稀釋) ,加 20 微升到 96 孔板的樣品孔中。由于移液器在取小量樣品時誤差偏大,標準線前面的點可能不很準確,所以盡可能的讓樣品點落在標準線 1/2 后。
4. 各孔加入 200 微升 BCA 工作液,37℃放置 15-30 分鐘。用酶標儀測定 A562nm,根據(jù)標準曲線計算出蛋白濃度。使用溫箱孵育時,應注意防止因水分蒸發(fā)影響檢測結果。
二. 分光光度計法
如沒有酶標儀,可用分光光度計在離心管中混勻后加入比色皿中比色。
步驟如下:
1. 配制工作液: 根據(jù)標準品和樣品數(shù)量,按 50 體積 BCA 試劑加 1 體積 Cu 試劑(50:1)配制成 BCA工作液,充分混勻(混合時可能會有渾濁,但混勻后就會消失)。BCA 工作液室溫 24 小時內穩(wěn)定。
2. 稀釋標準品:取 100 微升 BSA 標準品用 PBS 稀釋 1ml(樣品一般可用 PBS 稀釋) ,使終濃度為0.5mg/ml。
3. 取八支(或者更多)5ml 離心管,標上號,按下表加入試劑。
4. 37℃放置 15-30 分鐘。用分光光度計測 562nm 處吸光值,根據(jù)標準曲線計算出蛋白濃度。
注意事項 :
1. 長期不用時,Cu 試劑與 PBS 稀釋液可置于 2-8℃保存,如發(fā)現(xiàn)細菌污染則應丟棄。BCA 試劑在低溫條件下出現(xiàn)結晶沉淀時,可 37℃溫育使其*溶解, 不影響使用。
2. 樣品中若含有較多干擾物質時,請采用 Bradford 蛋白濃度測定試劑盒。
3. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
相關產(chǎn)品 :
PC0001 BSA 標準品( 5mg/ml )
PC0021 BCA 試劑
PC0030 Lowry 法蛋白濃度測定試劑盒
PC0010 Bradford 法蛋白濃度測定試劑盒
R0010 高效 RIPA 組織 / 細胞快速裂解液
R0050 核蛋白抽提試劑盒
P1300 SDS-PAGE 凝膠制備試劑盒
T1070 5×Tris- 甘氨酸電泳緩沖液
PR1600 預染低分子量蛋白 Marker
P1015 4× 蛋白上樣緩沖液(含 DTT )
D1060 10× 電泳轉移緩沖液
PE0010 ECL Plus 熒光檢測試劑 (ECL 超敏發(fā)光液 )
蛋白定量試劑 BCA蛋白濃度測定試劑盒
參考文獻:
《Dexmedetomidine attenuates the neurotoxicity of propofol toward primary hippocampal neurons in vitro via Erk1/2/CREB/BDNF signaling pathways》 作者:Youbing Tu, Yubing Liang, Yong Xiao, Jing Lv, Ruicong Guan, Fei Xiao, Yubo Xie, and Qiang Xiao 期刊:Drug Design, Development and Therapy 影響因子:3.486 PMID:30858699
《Salvanic acid B inhibits myocardial fibrosis through regulating TGF-β1/Smad signaling pathway》 作者:Hongyan Gao,Zhe Bo,Qin Wang,Ling Luo,Haiyi Zhu,Yi Ren 期刊:Biomedicine & Pharmacotherapy 影響因子:3.743 PMID:30553195
《miR‐193a/b‐3p relieves hepatic fibrosis and restrains proliferation and activation of hepatic stellate cells》 作者:Baoling Ju, Ying Nie, Xufang Yang, Xiaohua Wang, Fujuan Li, Meng Wang, Chuang Wang, Hongjun Zhang 期刊:Journal of Cellular and Molecular Medicine 影響因子:4.658 PMID:30945448