目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化檢測試劑盒-常量法>>其它系列>> BC3170-50T/48S乙酸激酶(ACK)活性檢測試劑盒 其它
CAS | 詳詢 | 純度 | 詳詢 |
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分子量 | 詳詢 | 分子式 | 詳詢 |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T/48S |
貨號 | BC3170 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),綜合 |
主要用途 | 乙酸激酶(ACK)活性檢測 |
試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
提取液 | 液體50 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑一 | 液體30 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑二 | 粉劑×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑三 | 粉劑×2瓶 | -20℃保存 |
試劑四 | 粉劑×2瓶 | -20℃保存 |
試劑五 | 粉劑×1支 | -20℃保存 |
試劑六 | 液體95 μL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑七 | 液體110 μL×1瓶 | -20℃保存 |
試劑八 | 粉劑×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑九 | 粉劑×1支 | 2-8℃保存 |
提取液:臨用前將試劑九加入到提取液中,并于2-8℃保存;
試劑二:臨用前每瓶加入4 mL蒸餾水,充分溶解待用。用不完的試劑仍2-8℃保存;
試劑三:臨用前每瓶加入3 mL蒸餾水,充分溶解待用;用不完的試劑-20℃保存;
試劑四:臨用前每瓶加入2 mL蒸餾水,充分溶解待用;用不完的試劑-20℃保存;
試劑五:臨用前每支加入1 mL蒸餾水,充分溶解待用;用不完的試劑-20℃保存;
試劑六:液體置于試劑瓶內(nèi)EP管中。臨用前根據(jù)樣本量將試劑六、蒸餾水按43:457(V:V)的比例配制備用,現(xiàn)用現(xiàn)配;
試劑七:液體置于試劑瓶內(nèi)EP管中。臨用前根據(jù)樣本量將試劑七、蒸餾水按1:9(V:V)的比例配制備用,現(xiàn)用現(xiàn)配;
試劑八:臨用前加入5 mL蒸餾水,充分溶解待用。用不完的試劑仍2-8℃保存;
工作液:吸取0.3 mL 試劑二、1 mL試劑三、0.65 mL試劑四、0.2 mL試劑五、0.2 mL試劑六、0.2 mL試劑七、1 mL試劑八混勻,也可根據(jù)比例現(xiàn)用現(xiàn)配,于冰上備用。
測定過程中樣本和所有試劑在冰上放置,以免變性和失活。
比色皿中反應(yīng)液的溫度必須保持37℃或25℃,取小燒杯一只裝入一定量的37℃或25℃蒸餾水,將此燒杯放入37℃或25℃水浴鍋中。在反應(yīng)過程中把比色皿連同反應(yīng)液放在此燒杯中。
ΔA大于1時(shí),建議稀釋后測量,注意計(jì)算公式乘以稀釋倍數(shù);ΔA小于0.01時(shí),建議延長反應(yīng)時(shí)間測量,注意計(jì)算公式變化。
取0.1g腎臟組織樣本,加入1mL提取液進(jìn)行勻漿研磨,取上清后按照測定步驟操作,測得計(jì)算ΔA測定=A測定1-A測定2=1.893-1.147=0.746,ΔA空白=A空白1-A空白2=1.453-1.448=0.005,ΔA=ΔA測定-ΔA空白= 0.746-0.005=0.741,按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得:
取500萬大腸桿菌加入1mL提取液超聲破碎,離心,取上清后按照測定步驟操作,測得計(jì)算ΔA測定=A測定1-A測定2=1.476-1.448=0.028,ΔA空白=A空白1-A空白2=1.453-1.448=0.005,ΔA=ΔA測定-ΔA空白=0.028-0.005=0.023,按細(xì)菌數(shù)量計(jì)算酶活得:
Mukhopadhyay S, Hasson M S, Sanders D A. A continuous assay of acetate kinase activity: Measurement of inorganic phosphate release generated by hydroxylaminolysis of acetyl phosphate[J]. Bioorganic chemistry, 2008, 36(2): 65-69.
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