血鉀濃度檢測(cè)試劑盒說(shuō)
明書(shū)
微量法
注意：本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng)，請(qǐng)注意并嚴(yán)格按照該說(shuō)明書(shū)操作。
貨號(hào)：BC2775
規(guī)格：100T/96S
產(chǎn)品組成：使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致，有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 試劑一工作液：臨用前按試劑一（mL）：濃硫酸（μL）=5:12的比例按需配制；

2. 試劑二：臨用前配制，取1.2mL試劑二A加入到試劑二B瓶中，混勻，2-8℃保存1周；

3. 標(biāo)準(zhǔn)液：2 μmol/mL 鉀標(biāo)準(zhǔn)液。

產(chǎn)品說(shuō)明：
鉀保持機(jī)體的正常滲透壓及酸堿平衡，參與糖及蛋白代謝，保證神經(jīng)肌肉的正常功能。血清鉀高于5.5mmol/L時(shí)稱高血鉀，高血鉀可使神經(jīng)、肌肉應(yīng)激性增高，使心肌應(yīng)激性降低，導(dǎo)致心動(dòng)過(guò)緩，血清鉀超過(guò)10mmol/L時(shí)，可發(fā)生心室纖顫，甚至心臟在舒張期停跳。血清鉀低于3.5mmol/L時(shí)稱低血鉀，低血鉀可引起肌無(wú)力甚至肌肉弛緩性麻痹，引起心肌應(yīng)激性增高，出現(xiàn)心動(dòng)過(guò)速、心律紊亂甚至在收縮期停跳。因此血清鉀是常用的生化測(cè)定指標(biāo)。
血清中鉀離子與四苯硼鈉作用，形成不溶于水的四苯硼鉀，產(chǎn)生的濁度在一定范圍內(nèi)與鉀離子濃度成正比。通過(guò)測(cè)定其濁度來(lái)測(cè)定血清鉀含量。

技術(shù)指標(biāo)：
低檢出限：0.0175 μmol/mL
線性范圍：0.125-3 μmol/mL
注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品：
離心機(jī)、可調(diào)式移液槍、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、濃硫酸、蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見(jiàn)“產(chǎn)品資料"附件
一、樣本處理（可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量，具體比例可以參考文獻(xiàn)）
血清預(yù)處理：取EP管，依次加入50μL血清，450μL試劑一工作液，充分混勻后室溫（25℃左右），8000rpm，離心10min，取上清液，待測(cè)。

二、測(cè)定步驟
1. 分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到520nm，分光光度計(jì)蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑三置于25℃水浴中預(yù)熱30min以上。
3. 標(biāo)準(zhǔn)溶液的稀釋：取100μL 2 μmol/mL鉀標(biāo)準(zhǔn)液，加入100μL蒸餾水，充分混勻，配制成1 μmol/mL標(biāo)準(zhǔn)液使用，現(xiàn)用現(xiàn)配。（實(shí)驗(yàn)中每管需要40μL，為減小實(shí)驗(yàn)誤差，故配制大體積。）
4. 操作表：

三、血鉀濃度計(jì)算
血鉀濃度（μmol/mL）=[C標(biāo)準(zhǔn)液×(A測(cè)定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)]×樣本稀釋倍數(shù)
                       =10×(A測(cè)定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)
C標(biāo)準(zhǔn)液：1 μmol/mL；樣本稀釋倍數(shù)：(50μL血清+450μL試劑一)÷50μL血清=10。
注意事項(xiàng)
1、采血后宜盡早進(jìn)行血清鉀測(cè)定，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)影響血清鉀含量。
2、如果樣本吸光值大于1.1，建議將樣本用試劑一工作液稀釋后進(jìn)行測(cè)定。
實(shí)驗(yàn)實(shí)例：

1. 取小鼠血清按照測(cè)定步驟操作，使用96孔板測(cè)得A測(cè)定管= 0.261，A空白管=0.048，A標(biāo)準(zhǔn)管=0.427，計(jì)算：

血鉀濃度（μmol/mL）=10×(A測(cè)定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)=5.62 μmol/mL。
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