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目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒-微量法>>微量法生化試劑盒>> BC3175-100T/96S乙酸激酶(ACK)活性檢測(cè)試劑盒 微量法

乙酸激酶(ACK)活性檢測(cè)試劑盒 微量法
  • 乙酸激酶(ACK)活性檢測(cè)試劑盒 微量法
參考價(jià) 面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
參考價(jià) 面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 品牌 SOLARBIO/索萊寶
  • 型號(hào) BC3175-100T/96S
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
  • 產(chǎn)品資料 查看pdf文檔
  • 所在地 北京市
屬性

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更新時(shí)間:2024-04-12 09:17:41瀏覽次數(shù):619評(píng)價(jià)

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CAS 詳詢(xún) 純度 詳詢(xún)
分子量 詳詢(xún) 分子式 詳詢(xún)
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100T/96S
貨號(hào) BC3175 應(yīng)用領(lǐng)域 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),綜合
主要用途 乙酸激酶(ACK)活性檢測(cè)
儲(chǔ)存條件
-20℃
乙酸激酶(ACK)活性檢測(cè)試劑盒 微量法
有效期
6個(gè)月
單位

推薦
若使用96孔板測(cè)定,需使用96孔UV板,推薦貨號(hào)YA0602
英文名稱(chēng)
Acetokinase(ACK) Activity Assay Kit
別名
乙酸激酶(ACK)活性檢測(cè)試劑盒
檢測(cè)方法
微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader
規(guī)格
100T/96S


乙酸激酶(ACK)活性檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
微量法
注意:本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng),請(qǐng)注意并嚴(yán)格按照該說(shuō)明書(shū)操作。
貨號(hào)BC3175
規(guī)格100T/96S
產(chǎn)品組成:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致,有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱(chēng)規(guī)格保存條件
提取液液體100 mL×1瓶2-8℃保存
試劑一液體15 mL×1瓶2-8℃保存
試劑二粉劑×12-8℃保存
試劑三粉劑×2-20℃保存
試劑四粉劑×1-20℃保存
試劑五粉劑×1-20℃保存
試劑六液體48 μL×12-8℃保存
試劑七液體55 μL×1-20℃保存
試劑八粉劑×12-8℃保存
試劑九粉劑×12-8℃保存

溶液的配制:

  1. 提取液:臨用前將試劑九加入到提取液中,并于2-8℃保存;

  2. 試劑二:臨用前每瓶加入1 mL蒸餾水,充分溶解待用。用不完的試劑仍2-8℃保存;

  3. 試劑三:臨用前每瓶加入1 mL蒸餾水,充分溶解待用;用不完的試劑-20℃保存;

  4. 試劑四:臨用前每瓶加入2 mL蒸餾水,充分溶解待用;用不完的試劑-20℃保存;

  5. 試劑五:臨用前每支加入0.5 mL蒸餾水,充分溶解待用;用不完的試劑-20℃保存;

  6. 試劑六:液體置于試劑瓶?jī)?nèi)EP管中。臨用前根據(jù)樣本量將試劑蒸餾水按43:457(V:V)的比例配制備用,現(xiàn)用現(xiàn)配;

  7. 試劑七:液體置于試劑瓶?jī)?nèi)EP管中。臨用前根據(jù)樣本量將試劑、蒸餾水按1:9(V:V)的比例配制備用,現(xiàn)用現(xiàn)配;

  8. 試劑八:臨用前加入5 mL蒸餾水,充分溶解待用。用不完的試劑仍2-8℃保存;

  9. 工作液:吸取0.06 mL 試劑二、0.2 mL試劑三、0.13 mL試劑四、0.04 mL試劑五、0.04 mL試劑六、0.04 mL試劑七、0.2 mL試劑八混勻,也可根據(jù)比例現(xiàn)用現(xiàn)配,于冰上備用。

產(chǎn)品說(shuō)明:
ACK廣泛存在于生物體內(nèi),催化乙酸和ATP生成乙酰磷酸和ADP,是細(xì)菌碳代謝和能量代謝的關(guān)鍵酶,尤其是在古細(xì)菌甲烷合成代謝中起著中樞作用。
測(cè)定原理如下:(1)ACK催化乙酸鈉和ATP生成乙酰磷酸和ADP,(2)丙 酮酸激酶催化ADPPEP生成ATP和丙 酮酸,(3)乳酸脫氫酶催化丙 酮酸和NADH生成乳酸和NAD+,(4)在340nm下測(cè)定NADH氧化生成NAD+

速率,即可反映ACK活性。
注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
自備的儀器和用品
臺(tái)式離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、微量石英比色皿/96UV板、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器、冰、蒸餾水。

操作步驟具體操作步驟詳見(jiàn)“產(chǎn)品資料"附件

注意事項(xiàng):

  1. 測(cè)定過(guò)程中樣本和所有試劑在冰上放置,以免變性和失活。

  2. 反應(yīng)液的溫度必須保持37℃或25℃,比色皿測(cè)定時(shí)可取小燒杯一只裝入一定量的37℃25℃蒸餾水,將此燒杯放入37℃25℃水浴鍋中。在反應(yīng)過(guò)程中把比色皿連同反應(yīng)液放在此燒杯中。

  3. ΔA大于1時(shí),建議稀釋后測(cè)量,注意計(jì)算公式乘以稀釋倍數(shù);ΔA小于0.01時(shí),建議延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間測(cè)量,注意計(jì)算公式變化。

實(shí)驗(yàn)實(shí)例:

  1. 取0.1g腎臟組織樣本,加入1mL提取液進(jìn)行勻漿研磨,取上清后按照測(cè)定步驟操作,用微量石英比色皿測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定1-A測(cè)定2=1.7666-1.0488=0.7178ΔA空白=A空白1-A空白2=1.3902-1.3553=0.0349,ΔA=ΔA測(cè)定-ΔA空白=0.7178-0.0349=0.6829按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得ACK(U/g 質(zhì)量)=536×ΔA÷W=536×0.6829÷0.1=3660.344 U/g 質(zhì)量。

  2. 500萬(wàn)大腸桿菌加入1mL提取液超聲破碎,離心,取上清后按照測(cè)定步驟操作,用微量石英比色皿測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定1-A測(cè)定2=1.3965-1.3503=0.0462ΔA空白=A空白1-A空白2=1.3902-1.3553=0.0349,ΔA=ΔA測(cè)定-ΔA空白=0.0462-0.0349=0.0113,按細(xì)菌數(shù)量計(jì)算酶活得ACK(U/104 cell)=1.072×ΔA=1.072×0.0113=0.0121136 U/104 cell。

參考文獻(xiàn):

  1. Mukhopadhyay S, Hasson M S, Sanders D A. A continuous assay of acetate kinase activity: Measurement of inorganic phosphate release generated by hydroxylaminolysis of acetyl phosphate[J]. Bioorganic chemistry, 2008, 36(2): 65-69.

相關(guān)系列產(chǎn)品:
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乙酸激酶(ACK)活性檢測(cè)試劑盒 微量法 乙酸激酶(ACK)活性檢測(cè)試劑盒 微量法

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