目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化檢測試劑盒-微量法>>微量法生化試劑盒>> BC4175-100T/96S肉桂醇脫氫酶活性檢測試劑盒 微量法
CAS | 詳詢 | 純度 | 詳詢 |
---|---|---|---|
分子量 | 詳詢 | 分子式 | 詳詢 |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100T/96S |
貨號 | BC4175-100T/96S | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),綜合 |
主要用途 | 肉桂醇脫氫酶(CAD)活性檢測 |
試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
提取液 | 液體120 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑一 | 粉劑×1瓶 | -20℃保存 |
試劑二 | 液體×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑三 | 液體25 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
提取液:內(nèi)含不溶物,使用前搖勻。
試劑一:臨用前加入5 mL試劑三溶解??扇芙夂蠓盅b-20℃保存,避免反復(fù)凍融。
試劑二:液體置于試劑瓶內(nèi)玻璃管中。臨用前加入15 mL乙醇充分混勻,配好后2-8℃保存。
工作液的配制:將試劑一、試劑二、試劑三按1:1:2(V:V:V)的比例配制工作液,工作液現(xiàn)用現(xiàn)配。
紫外分光光度計/酶標儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至340nm,紫外分光光度計蒸餾水調(diào)零。
操作表:在微量石英比色皿/96孔UV板中分別加入下列試劑:
試劑名稱 | 空白管 | 測定管 |
樣本(µL) | 20 | |
蒸餾水(µL) | 20 | |
工作液(µL) | 180 | 180 |
在微量石英比色皿/96孔UV板中分別加入上述試劑,充分混勻后于340nm處測定10s時的吸光值A1,迅速置于25℃水浴或培養(yǎng)箱5min(酶標儀有控溫功能可將溫度調(diào)至25℃),拿出迅速擦干測定5min10s時的吸光值A2,計算ΔA測定管=A1測定-A2測定,ΔA空白管=A1空白-A2空白,ΔA=ΔA測定管-ΔA空白管(空白管只需做1-2次)。 |
當(dāng)A1小于0.8,建議將樣本用蒸餾水稀釋后再進行測定。
空白管為檢測各試劑組分質(zhì)量的檢測孔,正常情況下,變化不超過0.04。
取約0.1g三葉草葉,加入1mL提取液進行冰浴勻漿,然后10000g,4℃,離心10min,取上清,按照測定步驟操作,用微量石英比色皿測定計算ΔA測定管= A1測定-A2測定=1.7889-1.7045=0.0844,ΔA空白管=A1空白-A2空白=0.9630-0.9433=0.0197,ΔA=ΔA測定管-ΔA空白管=0.0844-0.0197=0.0647,按樣本質(zhì)量計算得:CAD酶活(U/g 質(zhì)量)=321.54×ΔA÷W=208.0364 U/g 質(zhì)量。
肉桂醇脫氫酶活性檢測試劑盒 微量法 肉桂醇脫氫酶活性檢測試劑盒 微量法