目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化檢測試劑盒-微量法>>微量法生化試劑盒>> BC4265-100T/96S直鏈淀粉含量檢測試劑盒 微量法
| CAS | 詳詢 | 純度 | 詳詢 |
|---|---|---|---|
| 分子量 | 詳詢 | 分子式 | 詳詢 |
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100T/96S |
| 貨號 | BC4265 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),綜合 |
| 主要用途 | 直鏈淀粉含量檢測 |
| 試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
| 試劑一 | 液體110 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑二 | 液體100 mL×1瓶（自備） | 2-8℃保存 |
| 試劑三 | 液體55 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑四 | - | 2-8℃保存 |
| 試劑五 | 液體0.5 mL×1支 | 2-8℃保存 |
| 試劑六 | 液體10mL×1支 | 2-8℃保存 |
| 標(biāo)準(zhǔn)品 | 粉劑×1支 | 2-8℃保存 |
試劑二：*100 mL自備；
試劑四：提供125 mL空瓶一個；將試劑三：H2O =9 mL：91 mL混勻，現(xiàn)用現(xiàn)配，2-8℃保存半年；
標(biāo)準(zhǔn)品：10 mg直鏈淀粉。臨用前加入0.1 mL無水乙醇和0.9 mL試劑三，混勻后封口膜封口，沸水浴至溶解，即10 mg/mL的直鏈淀粉，2-8℃保存半年。
樣本處理（可適當(dāng)調(diào)整待測樣本量，具體比例可以參考文獻(xiàn)）
稱取0.01g烘干樣本，加入1mL試劑一，充分勻漿；
80℃水浴提取30min，3000g，25℃離心5min，棄上清，留沉淀；
在步驟2沉淀中加入1mL試劑二（*）振蕩 5min；3000g，25℃離心5min，棄上清，留沉淀；
在步驟3沉淀中加入5mL試劑四充分溶解，90℃水浴10min，冷卻后3000g，25℃離心5min，取上清待測。
分光光度計/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)雙波長至550nm和485nm，分光光度計蒸餾水調(diào)零。
標(biāo)準(zhǔn)溶液的稀釋：取40μL 10mg/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液，加入960μL試劑四，充分混勻，配制成0.4mg/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液使用，現(xiàn)用現(xiàn)配。（實(shí)驗(yàn)中每管需要20μL，為減小實(shí)驗(yàn)誤差，故配制大體積。）
操作表 (在1.5mL離心管或96孔板中依次加入下列試劑) ：
| 試劑名稱 | 測定管 | 標(biāo)準(zhǔn)管 | 空白管 |
| 樣本（µL） | 20 | - | - |
| 標(biāo)準(zhǔn)溶液（μL） | - | 20 | - |
| 蒸餾水（µL） | - | - | 20 |
| 試劑五（µL） | 4 | 4 | 4 |
| 試劑六（µL） | 4 | 4 | 4 |
| 蒸餾水（µL） | 172 | 172 | 172 |
| 充分混勻，測定550nm和485nm處的吸光值，550nm下的測定管、標(biāo)準(zhǔn)管、空白管分別記為A測定、A標(biāo)準(zhǔn)和A空白，485nm下的分別記為A’測定、A’標(biāo)準(zhǔn)和A’空白，計算ΔA測定=（A測定-A空白）-（A’測定-A’空白），ΔA標(biāo)準(zhǔn)=（A標(biāo)準(zhǔn)-A空白）-（A’標(biāo)準(zhǔn)-A’空白）。標(biāo)準(zhǔn)管和空白管只需測1-2次。 | |||
反應(yīng)后建議在20min內(nèi)檢測完成防止褪色。
若A測定大于0.95，建議樣本上清用試劑四稀釋后再進(jìn)行測定；若A測定低于0.07時，可以提取時減少試劑四體積進(jìn)行測定。注意同步修改計算公式。
取0.01g烘干玉米于研缽中研碎，加入1mL試劑一，充分勻漿后轉(zhuǎn)移到 EP 管中，80℃水浴提取30min，3000g，25℃離心5min，棄上清，留沉淀，加入1mL試劑二（*）振蕩5min，3000g，25℃離心5min，棄上清，留沉淀，加入5mL試劑四充分溶解，90℃水浴10min，冷卻后3000g，25℃離心5min，取上清，之后按照測定步驟操作，使用96孔板測得計算ΔA測定=（A測定-A空白）-（A’測定-A’空白）=（0.395-0.047）-（0.283-0.058）=0.123，ΔA標(biāo)準(zhǔn)=（A標(biāo)準(zhǔn)-A空白）-（A’標(biāo)準(zhǔn)-A’空白）=（0.517-0.047）-（0.317-0.058）=0.211，按樣本質(zhì)量計算含量得：直鏈淀粉含量（mg/g 質(zhì)量）=2×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W=116.59 mg/g 質(zhì)量。
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