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目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化檢測試劑盒-微量法>>微量法生化試劑盒>> BC4305-100T/48S外切β-1,4-葡聚糖酶/纖維二糖水解酶試劑盒

外切β-1,4-葡聚糖酶/纖維二糖水解酶試劑盒
  • 外切β-1,4-葡聚糖酶/纖維二糖水解酶試劑盒
參考價 面議
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
參考價 面議
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 品牌 SOLARBIO/索萊寶
  • 型號 BC4305-100T/48S
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
  • 產(chǎn)品資料 查看pdf文檔
  • 所在地 北京市
屬性

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更新時間:2024-04-16 14:01:01瀏覽次數(shù):641評價

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分子量 詳詢 分子式 詳詢
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100T/48S
貨號 BC4305 應(yīng)用領(lǐng)域 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),綜合
主要用途 外切β-1,4-葡聚糖酶/纖維二糖水解酶活性檢測
儲存條件
2-8℃
外切β-1,4-葡聚糖酶/纖維二糖水解酶試劑盒
有效期
6個月
單位

英文名稱
1,4-β-D-Glucan Cellobilhydrolase (C1) Activity Assay Kit
檢測方法
微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader
規(guī)格
100T/48S

外切β-1,4-葡聚糖酶/纖維二糖水解酶(C1)活性檢測試劑盒說明書

微量法

貨號:BC4305

規(guī)格:100T/48S

產(chǎn)品組成:使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱

規(guī)格

保存條件

提取液

液體60 mL×1

2-8℃保存

試劑一

粉劑×2

2-8℃保存

試劑二

液體30 mL×1

2-8℃保存

標(biāo)準(zhǔn)品

液體1 mL×1

2-8℃保存

溶液的配制:

1、 試劑一:臨用前取1瓶加入3 mL蒸餾水溶解備用,現(xiàn)用現(xiàn)配;2-8℃保存4周;

2、 標(biāo)準(zhǔn)品:5 μmol/mL 對硝基 苯* 溶液。

產(chǎn)品說明:

β-1,4-葡聚糖酶/纖維二糖水解酶(C1,EC3.2.1.91)存在于細(xì)菌、真菌和動物體內(nèi),是微生物纖維素降解酶系的主要組分,也是水解天然纖維素的必需組分,C1酶作用于纖維素線狀分子的末端,水解β-葡萄糖苷鍵,每次切下1個纖維二糖分子。

C1能夠催化對*纖維二糖苷 (PNPC)生成對硝 基 苯*,后者在400 nm有特征光吸收。

注意:實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。

需自備的儀器和用品:

可見分光光度計/酶標(biāo)儀、天平、臺式離心機(jī)、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、微量玻璃比色皿/96孔板、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器、EP管。

操作步驟:

一、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測樣本量,具體比例可以參考文獻(xiàn))

1、組織:按照組織質(zhì)量(g: 提取液體積(mL)1 : 5~10 的比例(建議稱取0.1 g 組織,加入1 mL提取液)進(jìn)行冰浴勻漿。10000g4℃離心10 min,取上清置冰上待測。

2、細(xì)菌、真菌:按照細(xì)菌或真菌數(shù)量104 : 提取液體積(mL500~1000 : 1 的比例(建議500萬細(xì)菌或真菌加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率200W,超聲3 s,間隔7s,總時間3min)然后10000g,4℃,離心10 min,取上清置冰上待測。

3、血清(漿)等液體:直接測定。

二、測定步驟

1、 分光光度計/酶標(biāo)儀預(yù)熱30 min以上,調(diào)節(jié)波長至400 nm,分光光度計蒸餾水調(diào)零。

2、 標(biāo)準(zhǔn)溶液的稀釋:取50μL 5 μmol/mL對硝 基 苯* 溶液,加入750μL蒸餾水,充分混勻,配制成0.3125 μmol/mL標(biāo)準(zhǔn)液使用,現(xiàn)用現(xiàn)配。(實驗中每管需要20μL,為減小實驗誤差,故配制大體積。)

3、 操作表(在1.5 mL離心管中依次加入下列試劑):

試劑名稱(µL

測定管

對照管

標(biāo)準(zhǔn)管

空白管

試劑一

80

-

-

-

蒸餾水

-

80

80

100

標(biāo)準(zhǔn)液

-

-

20

-

樣本

20

20

-

-

置于37水浴鍋或恒溫培養(yǎng)箱準(zhǔn)確反應(yīng)1h

-

-

試劑二

200

200

200

200

    渦旋混勻后室溫放置2 min,吸取200 μL于微量玻璃比色皿或96孔板中測定400 nm下的的吸光度,分別記為A測定管、A對照管、A標(biāo)準(zhǔn)管、A空白管。計算ΔA測定=A測定管-A對照管,ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管。每個測定管需設(shè)一個對照管。標(biāo)準(zhǔn)管和空白管只需測1-2次。

三、C1酶活計算

1、按照樣本蛋白濃度計算

酶活定義:每mg蛋白在反應(yīng)體系中每小時生成1 nmol對硝 基 苯*定義為一個酶活力單位。

C1 (U/mg prot) =ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷C標(biāo))×1000×V÷Cpr×V樣)÷T=312.5×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷Cpr

2、按照樣本質(zhì)量計算

酶活定義:每g樣本在反應(yīng)體系中每小時生成1 nmol對硝 基 苯*定義為一個酶活力單位。

C1 (U/g 質(zhì)量)= ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷C標(biāo))×1000×V÷(V÷V樣總×W)÷T=312.5×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W

3、按照細(xì)菌或真菌數(shù)量計算

酶活定義:每104個細(xì)菌或真菌在反應(yīng)體系中每小時生成1 nmol對硝 基 苯*定義為一個酶活力單位。

C1 (U/104 cell)= ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷C標(biāo))×1000×V÷(細(xì)菌或真菌數(shù)量×V ÷V樣總)÷T

=312.5×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷細(xì)菌或真菌數(shù)量

 4、按液體體積計算

酶活定義:每毫升液體在反應(yīng)體系中每小時催化生成1 nmol對 硝基 苯*為一個酶活力單位。

C1 (U/mL)= ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷C標(biāo))×1000×V÷V÷T=312.5×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)

C標(biāo):標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度:0.3125 μmol/mL;V樣:加入的樣本體積,0.02 mL;V樣總:加入的提取液體積,1 mLCpr:上清液蛋白濃度,mg/mLT:反應(yīng)時間,1 h;細(xì)菌或真菌數(shù)量:以萬計;W:樣本質(zhì)量,g1000:換算系數(shù),1 μmol=1000 nmol。

注意事項:

1、若吸光度大于1.5時,建議將樣本用提取液稀釋后進(jìn)行測定。計算公式乘以稀釋倍數(shù)。

實驗實例:

1、 0.1g香菇進(jìn)行樣本處理,離心取上清稀釋2倍后按照測定步驟操作,測得計算ΔA測定=A測定管-A對照管=1.454-0.047=1.407,ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管=0.292-0.047=0.245,根據(jù)樣本質(zhì)量計算酶活得:

C1U/g 質(zhì)量)=312.5×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W×2(稀釋倍數(shù))=312.5×1.407÷0.245÷0.1×2=35893 U/g 質(zhì)量。

相關(guān)系列產(chǎn)品:

BC0360/BC0365  β-1,3葡聚糖酶(β-1,3-GA)活性檢測試劑盒

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外切β-1,4-葡聚糖酶/纖維二糖水解酶試劑盒 外切β-1,4-葡聚糖酶/纖維二糖水解酶試劑盒


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