目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒-常量法>>糖代謝系列>> BC4440-50T/48S半纖維素含量檢測(cè)試劑盒 糖代謝
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更新時(shí)間:2024-04-16 16:32:51瀏覽次數(shù):863評(píng)價(jià)
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CAS | 詳詢 | 純度 | 詳詢 |
---|---|---|---|
分子量 | 詳詢 | 分子式 | 詳詢 |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T/48S |
貨號(hào) | BC4440 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),綜合 |
主要用途 | 半纖維素含量檢測(cè) |
半纖維素含量檢測(cè)試劑盒說明書
可見分光光度法
貨號(hào): BC4440
規(guī)格: 50T/48S
產(chǎn)品組成:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致,有疑問請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。
試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
提取液一 | 液體30 mL×1瓶 | 常溫保存 |
提取液二 | 液體30 mL×1瓶 | 常溫保存 |
試劑一 | 液體60 mL×1瓶(自備) | 2-8℃保存 |
試劑二 | 2-8℃保存 | |
標(biāo)準(zhǔn)品 | 粉劑×1支 | 2-8℃保存 |
溶液的配制:
1、 試劑一:80%乙醇自備;
2、 標(biāo)準(zhǔn)品:10 mg D-木糖。臨用前加入1 mL蒸餾水溶解配制成10 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液。2-8℃保存4周。
產(chǎn)品說明:
半纖維素是指在植物細(xì)胞壁中與纖維素共生、可溶于堿溶液,遇酸后遠(yuǎn)較纖維素易于水解的那部分植物多糖,廣泛存在于植物中,其分布因植物種屬、成熟程度、早晚材、細(xì)胞類型及其形態(tài)學(xué)部位的不同而有很大差異。一種植物往往含有幾種由兩或三種糖基構(gòu)成的半纖維素,其化學(xué)結(jié)構(gòu)各不相同。半纖維素是一種新型的可利用能源。
半纖維素在一定條件下水解為還原性糖類,還原糖在堿性條件下與3,5-二硝基水楊酸(DNS)加熱被氧化成糖酸及其它產(chǎn)物,DNS則被還原為棕紅色3-氨基-5-硝基水楊酸,在540nm處具有特征吸收峰,通過吸光值的變化即可定量檢測(cè)半纖維素的含量
技術(shù)指標(biāo):
低檢出限:0.2311 mg/mL
線性范圍:0.4-2.5 mg/mL
注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品:
天平、可見分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、恒溫水浴鍋、1mL玻璃比色皿、可調(diào)式移液槍、研缽、30~50目篩、蒸餾水、EP管。
一、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量,具體比例可以參考文獻(xiàn))
樣本自然風(fēng)干或用烘箱烘干至恒重,研缽充分研磨后,過30~50目篩。
1、 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至540 nm,蒸餾水調(diào)零。
2、 標(biāo)準(zhǔn)液的稀釋:將10 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液用蒸餾水稀釋至2.5、2、1、0.8、0.6、0.4 mg/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液待測(cè)。
3、 標(biāo)準(zhǔn)液稀釋可參考下表:
序號(hào) | 稀釋前濃度(mg/mL) | 標(biāo)準(zhǔn)液體積(µL) | 蒸餾水體積(µL) | 稀釋后濃度(mg/mL) |
1 | 10 | 50 | 150 | 2.5 |
2 | 10 | 40 | 160 | 2 |
3 | 10 | 50 | 450 | 1 |
4 | 1 | 160 | 40 | 0.8 |
5 | 1 | 120 | 80 | 0.6 |
6 | 1 | 80 | 120 | 0.4 |
備注:實(shí)驗(yàn)中每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)管需125µL標(biāo)準(zhǔn)溶液。
4、 操作表(在1.5 mL EP管中操作):
試劑名稱 | 空白管 | 測(cè)定管 | 標(biāo)準(zhǔn)管 |
樣本(g) | 0.05 | ||
試劑一(μL) | 1000 | ||
漩渦混勻,90℃水浴10 min,25℃,8000 g離心10 min,棄上清留沉淀 | |||
蒸餾水(μL) | 1000 | ||
漩渦混勻,25℃,8000 g離心10 min,棄上清,此步驟重復(fù)三次,取沉淀,烘干至恒重 | |||
提取液一(μL) | 500 | 500 | |
90℃水浴1 h,自然冷卻至室溫 | |||
提取液二(μL) | 500 | 500 | |
漩渦混勻,25℃,8000 g離心10 min,取上清待測(cè) | |||
上清液(μL) | 125 | 125 | |
標(biāo)準(zhǔn)液(μL) | 125 | ||
試劑二(μL) | 125 | 125 | 125 |
蒸餾水(μL) | 750 | 750 | 750 |
漩渦混勻,90℃水浴5 min,自然冷卻至室溫 | |||
取1 mL反應(yīng)液于1 mL玻璃比色皿中,在540 nm下測(cè)定吸光值A,分別記為A空白、A測(cè)定、A標(biāo)準(zhǔn),計(jì)算ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)-A空白,ΔA測(cè)定=A測(cè)定-A空白。標(biāo)準(zhǔn)曲線和空白管只需測(cè)定1-2次。 |
1、標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制:
根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)管的濃度(y,mg/mL)和吸光度ΔA標(biāo)準(zhǔn)(x,ΔA標(biāo)準(zhǔn)),建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線,將ΔA測(cè)定(x,ΔA測(cè)定)帶入公式計(jì)算樣本濃度(y,mg/mL)。
2、半纖維素含量的計(jì)算:
半纖維素含量(mg/g 干重)= y×V樣總÷W×F= y÷W×F
V樣總:加入提取液體積,1 mL;W:樣本質(zhì)量,g;F:稀釋倍數(shù)。
注意事項(xiàng):
1、如果測(cè)定吸光值超過線性范圍吸光值,可以增加樣本量或者稀釋樣本后再進(jìn)行測(cè)定。
2、建議將加入提取液二離心后的上清液稀釋10~20倍后檢測(cè)。計(jì)算公式中注意乘以稀釋倍數(shù)。
相關(guān)系列產(chǎn)品:
BC3330/BC3335 糖原合成酶活(GCS)性檢測(cè)試劑盒
BC3360/BC3365 UDPG焦磷酸化酶(UGP)活性檢測(cè)試劑盒
BC4290/BC4295 N-乙?;?/span>-β-葡萄糖苷酶(NAG)活性檢測(cè)試劑盒
半纖維素含量檢測(cè)試劑盒 糖代謝 半纖維素含量檢測(cè)試劑盒 糖代謝
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