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核酸提取試劑 內(nèi)毒素清除劑
貨號:E1040
規(guī)格:20ml/ 100ml
保存:4℃半年有效,-20℃長期儲存。
產(chǎn)品簡介:
本公司生產(chǎn)的內(nèi)毒素清除劑主要用于清除 DNA、蛋白質(zhì)或其他液體樣品中的內(nèi)毒素。在特定的 pH 值、鹽濃度和溫度條件下,內(nèi)毒素清除劑能與 DNA、重組蛋白以及液體樣品中的內(nèi)毒素特異性結合,經(jīng)過室溫高速離心后,DNA 或蛋白質(zhì)等保留在水相,而內(nèi)毒素則被濃縮到極小體積的下層相而被清除。經(jīng)過 3 次以上重復抽提后可將活性為 5000~50000 EU/ml 的內(nèi)毒素水平降低到 5~0.5 EU/ml 以下,即降低 1000~10000 倍。
操作步驟:
提取前請將內(nèi)毒素清除劑放在冰上冰浴 5min,期間翻轉(zhuǎn)瓶子數(shù)次使試劑均勻預冷。
1、a)已純化的質(zhì)粒 DNA 內(nèi)毒素清除: 吸取 500μl DNA 溶液于微型離心管, 加入 1/10 體積 3M NaAc pH5.2或 1/20 體積 5M NaCl 溶液,冰浴 5min。
b)在提取質(zhì)粒 DNA 過程中清除內(nèi)毒素:以堿裂解法提取質(zhì)粒為例,在加入裂解液和中和液并離心去除碎片之后,吸取含質(zhì)粒 DNA 的上清于新離心管中,冰浴 5min。
2、加入 1/5 體積預冷的內(nèi)毒素清除劑,振蕩混勻,溶液變渾濁。
3、冰浴 5min,溶液應變清亮。
4、37℃水浴 5min,不時振蕩,溶液又變渾濁。
5、12000rpm 室溫離心 5min,溶液應分為兩相,上層水相含 DNA,下層油狀相含內(nèi)毒素。
6、將含 DNA 的上層水相轉(zhuǎn)移到新管,棄油狀相,重復抽提三次,即重復步驟 2-6 三次。
7、加入 2.5 體積無水乙醇,-20℃沉淀 30min ;12000rpm 離心 10min,棄上清;加入 70%乙醇洗滌沉淀12000rpm 離心 5min 棄上清;空氣干燥沉淀,加入 100~200μl 無內(nèi)毒素的高純水或 TE 溶解沉淀。
8、用內(nèi)毒素檢測試劑測定樣品中內(nèi)毒素活性,并與初始樣品比較。
注意事項:
1、DNA 濃度>1mg/ml 時清除內(nèi)毒素效率降低。由于 DNA 和蛋白質(zhì)本身的性質(zhì),清除程序可導致 10-20%的 DNA 丟失,所幸的是與清除內(nèi)毒素的艱難相比 DNA 更容易提取制備。
2、所有溶液應用無內(nèi)毒素的高純水配制,所有器械材料均應不含內(nèi)毒素,玻璃器皿可高溫烘烤,非揮發(fā)性水溶液可高壓 120℃高溫處理。
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核酸提取試劑 內(nèi)毒素清除劑訂購說明:
1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨,一般情況下都能訂貨當日發(fā)貨。
2、部分非常用產(chǎn)品,需提前1-2日預訂,海外期貨則需要提前3-6周預訂。
3、部分產(chǎn)品價格會因貨期、批次等因素發(fā)生變化,若有變動以訂貨當日新價格為準。
4、每日訂單截止時間為16點整,部分城市可到17點整,因超過截止時間造成當日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。
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運輸說明:
1、極低溫產(chǎn)品:極低溫產(chǎn)品運輸過程中加裝干冰運輸。用干冰把產(chǎn)品包裹起來,再用泡沫盒密封,膠帶層層粘住泡沫盒,放入索萊寶的箱子,然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實驗保駕護航。
2、低溫產(chǎn)品:低溫產(chǎn)品運輸過程中加裝索萊寶冰袋運輸。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來,再使用泡沫盒密封,用膠帶嚴實密封泡沫盒,再放入索萊寶的箱子(保溫效果少可以持續(xù)一周),然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實驗保駕護航。
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