目錄:北京索萊寶科技有限公司>>分子生物學(xué)>>核酸提取相關(guān)試劑>> G8142GoldView II型核酸染色劑(5000×)
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更新時(shí)間:2024-03-22 13:53:49瀏覽次數(shù):1252評(píng)價(jià)
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 0.5mL |
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貨號(hào) | G8142 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 | 核酸染色 |
注意:
本產(chǎn)品屬于微量核酸檢測(cè)試劑,使用時(shí)請(qǐng)嚴(yán)格按照說明書操作。第一次使用前請(qǐng)融化后離心再開封。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
GoldView II 是一種可代替溴化乙錠(EB)的新型花青類核酸染料,采用瓊脂糖電泳檢測(cè) DNA 時(shí),GoldViewII 與核酸結(jié)合后能產(chǎn)生很強(qiáng)的熒光信號(hào),其靈敏度比 EB 強(qiáng) 5-10 倍,使用方法與之*相同。GoldView II 與核酸結(jié)合后,最大吸收峰為 497nm,另外,其在 254nm 處也有一強(qiáng)吸收峰,發(fā)射波長(zhǎng)為 520nm,在紫外透射光下雙鏈DNA 呈現(xiàn)綠色熒光,而且也可用于染 RNA。通過 Ames 試驗(yàn)、小鼠骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核試驗(yàn)、小鼠睪丸精母細(xì)胞染色體畸變?cè)囼?yàn),致突變性結(jié)果均為陰性;而溴化乙錠(EB)是一種強(qiáng)致癌劑。因此用 Goldview II 代替 EB 不失為一種明智的選擇。本產(chǎn)品為 DMSO 溶解,低溫時(shí)為固體狀態(tài),溫度到達(dá) 20℃以上即可融化。
使用方法:
膠染:
由于 GoldView II 敏感度比 EB 高數(shù)倍,使用時(shí),請(qǐng)將商品化的 Marker 用 1×DNA Loading Buffer 作 5-10 倍的稀釋,上樣 1-10µl, 以得到較好的結(jié)果(通常稀釋 10 倍后上樣 5ul)。對(duì)于待檢測(cè)樣品,通常僅需 1-2µl 即可。如果濃度較高,也須作一定倍數(shù)稀釋,否則會(huì)造成條帶不整,影響遷移速率。凝膠回收請(qǐng)選擇點(diǎn)染方法。
將 50ml 瓊脂糖凝膠溶液(濃度一般為 0.8%~2%)在微波爐中融化。
2. 冷卻至不燙手時(shí)加入 10-15µl GoldView II (不能少于 10ul),輕輕搖勻,避免產(chǎn)生氣泡。
3. 倒膠,待瓊脂糖凝膠*凝固后上樣電泳。
4. 電泳完畢在紫外燈下觀察。若使用數(shù)碼相機(jī)照像記錄,則關(guān)閉相機(jī)的閃光燈,放在自動(dòng)檔即可;若使用凝膠成像系統(tǒng)照相,通過調(diào)節(jié)光圈、曝光時(shí)間,選擇合適的濾光片,可得到成像清晰的照片。
點(diǎn)染:
染色效果不如膠染方法,但成本更低,同時(shí)適用于凝膠回收。
1. 常規(guī)方法制備不含任何染料的瓊脂糖凝膠。
2. 用 3×Loading Buffer 將本產(chǎn)品稀釋 500-1000 倍,現(xiàn)用現(xiàn)配。
3. 取稀釋后的染料 2µl 與 5µl 樣本混勻后上樣即可 。
泡染:
1.常規(guī)方法制備不含任何染料的瓊脂糖凝膠。
2.上樣,電泳后將膠放入經(jīng) TAE 稀釋 2000 倍的染料中浸泡 30 分鐘即可
注意事項(xiàng):
1. 膠厚度不宜超過 0.5cm,膠太厚會(huì)影響檢測(cè)的靈敏度。
2.雖然未發(fā)現(xiàn) GoldView II 有致癌作用,但其由 DMSO 溶解,對(duì)皮膚、眼睛會(huì)有一定的刺激,操作時(shí)應(yīng)戴上手套。
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